食品微生物检验技术之指示菌的检验.pptx

霉菌的形态观察技术

目录/Contents01微生物检验室霉菌形态观察技术

01霉菌的形态观察技术（一）直接制片观察法直接制片观察法：是将培养物置于乳酸石炭酸棉蓝染色液中，制成霉菌制片镜检。此染色液制成的霉菌标本片其特点是：①细胞不变形；②具有杀菌防腐作用，且不易干燥，能保持较长时间；③溶液本身呈蓝色，有一定染色效果。

01霉菌的形态观察技术（二）载玻片培养观察法载玻片培养观察法：此法是接种霉菌孢子于载玻片上的适宜培养基上，培养后用显微镜观察。这种方法可观察霉菌自然生长状态下的形态。

01霉菌的形态观察技术（三）玻璃纸培养观察法玻璃纸培养观察法：为了得到清晰、完整、保持自然状态的霉菌形态还可利用玻璃纸透析培养法进行观察。此法是利用玻璃纸的半透膜特性及透光性，将霉菌生长在覆盖于琼脂培养基表面的玻璃纸上，然后将长菌的玻璃纸剪取一小片，贴放在载玻片上用显微镜观察。

01霉菌的形态观察技术（1）一般观察法于洁净载玻片上，滴一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液，用解剖针从霉菌菌落的边缘处取小量带有孢子的菌丝置染色液中，再细心地将菌丝挑散开，然后小心地盖上盖玻片，注意不要产生气泡。置显微镜下先用低倍镜观察，必要时再换高倍镜。

01霉菌的形态观察技术（2）载玻片观察法①将略小于培养皿底内径的滤纸放入皿内，再放上U形玻棒，其上放一洁净的载玻片，然后将二个盖玻片分别斜立在载玻片的两端，盖上皿盖，把数套（根据需要而定）如此装置的培养皿叠起，包扎好，用1.05kg/cm2，121.3℃灭菌20min或干热灭菌，备用。②将6～7mL灭菌的马铃薯葡萄糖培养基倒入直径为9cm的灭菌平皿中，待凝固后，用无菌解剖刀切成0.5～1cm2的琼脂块，用刀尖铲起琼脂块放在已灭菌的培养皿内的载玻片上，每片上放置2块。

01霉菌的形态观察技术（2）载玻片观察法③用灭菌的尖细接种针或装有柄的缝衣针，取（肉眼方能看见的）一点霉菌孢子，轻轻点在琼脂块的边缘上，用无菌镊子夹着立在载玻片旁的盖玻片盖在琼脂块上，再盖上皿盖。④在培养皿的滤纸上，加无菌的20％甘油数毫升，至滤纸湿润即可停加。将培养皿置28℃培养一定时间后，取出载玻片置显微镜下观察。

食品商业无菌的检验

目录/Contents1材料、试剂及设备操作程序结果判定食品商业无菌的检验23

01材料、试剂及设备设备和材料冰箱；恒温培养箱；恒温水浴箱；均质器及无菌均质袋、均质杯或乳钵；电位pH计（精确度pH0.05单位）；显微镜；开罐器和罐头打孔器；电子秤或台式天平；超净工作台或百级洁净实验室

01材料、试剂及设备培养基和试剂无菌生理盐水；结晶紫染色液；二甲苯；含4％碘的乙醇溶液：4g碘溶于100mL的70%乙醇溶液。

02操作程序

02操作程序样品准备去除表面标签，在包装容器表面用防水的油性记号笔做好标记，并记录容器、编号、产品性状、泄漏情况、是否有小孔或锈蚀、压痕、膨胀及其他异常情况称重1kg及以下的包装物精确到1g，1kg以上的包装物精确到2g，10kg以上的包装物精确到10g，并记录

02操作程序保温每个批次取1个样品置2℃～5℃冰箱保存作为对照，将其余样品在36℃±1℃下保温10d。保温过程中应每天检查，如有膨胀或泄漏现象，应立即剔出，开启检查保温结束时，再次称重并记录，比较保温前后样品重量有无变化。如变轻，样品发生泄漏。将所有包装物置于室温直至开启检查

02操作程序开启膨胀样品，先置于2℃～5℃冰箱内冷藏数小时后开启用冷水和洗涤剂清洗待检样品的光滑面。水冲洗后用无菌毛巾擦干。以含4%碘的乙醇溶液浸泡消毒光滑面15min后用无菌毛巾擦干，密闭罩内点燃至残余的碘乙醇溶液全部燃烧完在超净工作台或百级洁净实验室中开启

02操作程序留样开启后，用灭菌吸管或其他适当工具以无菌操作取出内容物至少30mL（g）至灭菌容器内，保存2℃～5℃冰箱中，在需要时可用于进一步试验，待该批样品得出检验结论后可弃去。开启后的样品可进行适当的保存，以备日后容器检查时使用

02操作程序感官检查在光线充足、空气清洁无异味的检验室中，将样品内容物倾入白色搪瓷盘内，对产品的组织、形态、色泽和气味等进行观察和嗅闻，按压食品检查产品性状，鉴别食品有无腐败变质的迹象，同时观察包装容器内部和外部的情况，并记录

02操作程序pH测定样品处理：液态制品混匀备用，有固相和液相的制品则取混匀的液相部分备用测定：将电极插入被测试样液中，并将pH计的温度校正器调节到被测液的温度分析结果：与同批中冷藏保存对照样品相比，比较是否有显著差异。pH相差0.5及以上判为显著差异