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机能实验学实验报告
实验项目名称:蛙类基本操作、肌肉收缩性质
1.实验目的
学习坐骨神经腓肠肌标本的制备
观察骨骼肌的收缩形式,掌握神经冲动的频率与强度和肌肉收缩强
度与性质之间的关系
掌握阈刺激、最适刺激的概念和对应电压的测定方法
掌握单收缩和强直收缩的概念和在软件中对应的波形
2.实验原理
刺激引起兴奋的条件:刺激需在强度、持续时间、强度对时间的变
化率中的某一方面达到最小值。
阈值:如果刺激时间一定,引起组织兴奋所必需的最小刺激强度,
称为阈值或阈强度,刺激强度低于阈值的刺激无法引起组织兴奋。
最大收缩:将刺激强度逐步增大,肌肉收缩反应也相应增大,当肌
肉收缩不再随刺激强度增加而增大时的收缩,称最大收缩,此最小刺
激强度称为最适刺激。
单收缩:整块骨骼肌或单个肌细胞受到一次短促的刺激时,先是产
生一次动作电位,紧接着出现一次机械收缩,称为单收缩。
强直收缩:如果给肌肉以连续的脉冲刺激,当刺激频率增加到某一
限度时,后来的刺激在前一次收缩未结束前即到达肌肉,于是肌肉在
自身尚处于一定程度的缩短或张力存在的基础上进行新的收缩,发生
所谓的收缩融合,称强直收缩。强直收缩的幅度和时间均大于单收缩。
3.材料与方法
3.1实验对象
牛蛙3只
3.2实验器材与试剂
器材:蛙类手术器械2套,刺蛙针1根,锌铜弓1只,玻璃分针2
根,万能支架,任氏液,医用计算机实验系统,张力换能器
3.3实验方法与步骤
(1)坐骨神经—腓肠肌标本的制备:用刺蛙针穿过枕骨大孔捣毁牛
蛙脑组织和脊髓,用大剪刀除去牛蛙坐骨神经以上的躯干,剥去牛
蛙表皮,将标本以腓肠肌向上的方式固定在蛙板上。用玻璃分针游
离坐骨神经,用大剪刀截去股骨下端1.5cm以上除坐骨神经以外的
部分。用玻璃分针分离出腓肠肌后,取手术线穿过腓肠肌和比目鱼
肌的间隙,采取器械打结方式在腓肠肌和肌腱连接处打手术结,用
组织剪剪去其余部分得到与坐骨神经相连的腓肠肌,即坐骨神经—
腓肠肌标本。
(2)刺激强度对肌肉收缩影响:用锌铜弓刺激坐骨神经,观察标本
腓肠肌是否收缩,若腓肠肌收缩则标本活性良好。将坐骨神经—腓
肠肌标本固定在万能支架上,手术线在张力换能器上打结固定。在
Pc-Lab软件中选择“刺激强度和频率对肌肉收缩的而影响”模板,
刺激方式选择单次激,刺激强度选择0v,逐渐增大刺激强度,观察
肌肉收缩反应和软件中的张力-时间曲线,读出阈刺激和最适刺激强
度数值。
(3)刺激频率对肌肉收缩影响:刺激方式选择串刺激,脉冲数选择
1,刺激强度采用最适刺激强度,采样,观察单收缩波形的高度和宽
度。逐步增大脉冲数,观察收缩波形的高度、宽度和形状,直到出
现完全强直收缩。
3.4注意事项:
(1)在实验过程中应不断用任氏液浸润标本,避免其失活。
(2)在记录肌肉收缩的强直收缩时,一定要注意调大放大倍数。
否则在增加脉冲次数时,肌肉收缩波形不明显,原本为锯齿状的收缩
波形,但是由于放大倍数过小,肌肉收缩波形变为假性的平滑曲线,
最终导致数据错误。
(3)在骨骼肌收缩时,应让其休息一段时间后再做下一次刺激,
特别是在观察刺激频率的影响时。
(4)腓肠肌固定时应当与张力换能器垂直,避免测量过程产生分
力。
4.结果
图1
由图1可知,当刺激电压为0.24v时,腓肠肌不收缩,当刺激电压达
到0.25v时,腓肠肌收缩,由此可得,该坐骨神经—腓肠肌标本的阈
值为0.25v。
逐步增大刺激电压,当刺激电压达到0.33v后,腓肠肌肌张力不再增
大,由此可得该标本的最适刺激对应电压为0.33v。
图2
设定刺激电压为0.33v,主周期为500ms,逐步增加每周期内脉冲次
数,记录数据后得到图2。观察图2中肌张力的波形可知当每周期脉
冲数为1时,腓肠肌产生单收缩;当每周期脉冲次数大于2且小于
12时,腓肠肌产生的收缩均为不完全强直收缩;当每周期脉冲次数
大于等于12时,腓肠肌产生的收缩均为强直收缩。
5.讨论
5.1刺激电压与腓肠肌收缩幅度之间的关系
牛蛙的坐骨神经干由多条神经纤维组成,这些神经纤维的兴奋性各
不相同,当刺激电压较小(超过阈值)时,只有部分兴奋性高的
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