猪球虫病诊断技术.pdfVIP

猪球虫病诊断技术

1范围

本文件规定了猪球虫病临床诊断、病原检查、病理检查、综合判定等诊断技术要求。

本文件适用于猪球虫病的诊断、流行病学调查及检疫。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T18647-2020动物球虫病诊断技术

NY/T541-2016兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1猪球虫病swinecoccidiosis

猪球虫病是由艾美耳科（Eimeriidae）等孢属（Isospore）和艾美耳属（Eimeria）的16种球虫所引起

的以腹泻为特征的原虫病。

注1：9种常见种类的卵囊形态见附录A。

4临床诊断

4.1临床症状

4.1.1猪等孢球虫（又名囊等孢球虫）病

多发生于1周龄~2周龄哺乳仔猪，主要临床症状是腹泻，持续4d~8d，排泄物从黄色到白色，恶臭（见

附录C图C.1）。病猪表现为衰弱，脱水，发育迟缓，时有死亡，存活的仔猪生长发育严重受阻。

4.1.2猪艾美耳球虫病

主要见于1月龄~3月龄腹泻仔猪，主要症状为食欲不振，腹泻，时有腹泻与便秘交替，可持续7d~10d。

一般可自行耐过，逐渐康复。

4.2诊断

1

一般15日龄内的仔猪出现腹泻，用抗生素治疗无效时应怀疑为猪等孢球虫病。死后剖检，在仔猪小

肠粘膜涂片内发现大量的裂殖体和配子体即可确诊。发病后期，采集粪样，在粪便中可查出大量球虫卵

囊。

5病原学检查

5.1材料与试剂

5.1.1试剂

饱和盐水和2.5％重铬酸钾溶液，配置方法分别见附录B中B.1和B.2。

5.1.2器材

样品保存袋、记号笔、防水标签纸、孔径为0.25mm（60目）铜丝网或尼龙网、孔径为0.15mm（100

目）铜丝网或尼龙网、100mL量筒、50mL烧杯、50mL离心管、10mL离心管、吸管、镊子、天平、离心

机、麦克马斯特计数板、载玻片、盖玻片、显微镜等。

5.2样品采集、保存和运输

5.2.1粪便的采集

若是群体采样，采集新鲜粪便不少于300g；若是个体采样，采集新鲜粪便不少于100g。

5.2.2样品保存

样品采集后置于样品保存袋中，封口后，每份样品的包装袋上均要贴上标签，写明采集地点、采集

时间、年龄、粪便性状等详细资料，置于2°C~8°C冰箱内保存。

5.2.3样品运输

将所采集样品在24h内送往实验室进行检测，运输条件应符合NY/T541-2016。

5.3操作

5.3.1定性检查

5.3.1.1取新鲜粪便5g~10g，放入50mL烧杯，加入适量自来水。

5.3.1.2轻轻搅匀，依次经孔径为0.25mm和0.15mm铜丝网或尼龙网过滤。

5.3.1.3将滤液转移至50mL试管，600g（2500r/min）离心10min。

5.3.1.4倾去上清液，沉淀物中加入少量饱和盐水，混匀，将管内混悬液转移至10mL离心管内。

5.3.1.5室温（25°C）用饱和盐水加满离心管，盖上盖玻片（盖玻片应与液面接触），静置10min。

5.3.1.6取下盖玻片，将有液体的一面盖在载玻片上，将载玻片置于显微镜载物台上，用10×10或

10×40倍数进行检查。

5.3.1.7定性检查的判定标准如下。

a）发现球虫卵囊，判为阳性，说明该猪（群）已感染球虫。将球虫阳性粪样置于2.5%重铬酸钾溶

液，在25°C~28°C环境培养至孢子化卵囊，见附录A球虫卵囊形态特征，确定球虫种类；

b）未发现球虫卵囊，需从5.3.1.1开始，重复检查5次，仍未见球虫卵囊，该粪样可判为阴性。同时

还需连续采集粪便14d~21d，每天检查均未发现球虫卵囊，说明该猪（群）未感染球虫。

2

5.3.2定量检查

5.3.2.1对定性检查中呈阳性的粪样，需进行定量检查。

5.3.2.2将粪便充分混匀，每份粪样取3个重复。每个重复取10g放入