药物分离纯化技术之预处理技术.pptx

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预处理单元的

工作任务;①改变发酵液的物理性质(降低粘度等),以利于固液分离;

②尽可能使产物转入便于后处理的一相中(多数是液相);

③分离细胞、菌体和其它悬浮颗粒(细胞碎片、核酸和蛋白质的沉淀物);

④除去部分可溶性杂质。

;;;;青霉素发酵液;青霉素生产发酵工艺;菌种;培养基;抗生素制备的一般流程图;发酵液成分;;凝聚;凝聚和絮凝;凝聚;凝聚机理;常用的凝聚剂电解质;;絮凝;絮凝;;絮凝剂相对凝聚剂而言更昂贵,其使用剂量必须正确使用并仔细优化。

最佳的絮凝剂使用剂量为:一般为大概一半的粒子表面被聚合物覆盖时所使用的絮凝剂剂量。;;;;凝聚剂:主要是无机类电解质,大多为阳离子型,分无机盐类、金属氢氧化物类和聚合无机盐类等。

絮凝剂:其官能团分为阴离子、阳离子和非离子三大类型。;流体特性的改变;1.降低液体粘度

2.调整pH值

3.酶解法;降低液体黏度常用的方法有加水稀释法和加热法。;升高温度可有效降低液体黏度,从而提高过滤速率,常用于黏度随温度变化较大的流体。;①加热的温度必须控制在不影响目的药物活性的范围内;②对于发酵液,温度过高或时间过长,可能造成细胞溶解,胞内物质外溢,而增加发酵液的复杂性,影响其后的产物分离与纯化。

;pH值直接影响发酵液中某些物质的电离度和电荷性质,适当调节pH值可改善其过滤特性,同时也是各种预处理技术中的重要影响因素之一。对于氨基酸、蛋白质等两性物质作为杂质存在于液体中时,常采用调pH至等电点沉淀法。;3.酶解法;变性沉淀;;当蛋白质受到外界因素作用时,蛋白质分子结构从有规则的排列变成不规则排列,其物理性质也发生改变,并失去原有的生理活性,即蛋白质发生变性,变性蛋白质在水中的溶解度较小而以沉淀的形式从溶液中析出。

利用蛋白质的变性作用,除去混合液中杂蛋白的方法,称为变性沉淀法。;变性沉淀方法;变性沉淀特点;变性沉淀是否可逆?常用的方法有哪些?;等电点沉淀;为什么要进行预处理?;预处理的条件;预处理的目的;预处理方法的选择;预处理的方法;一、沉淀常用的几种方法;导致胶体稳定性的原因;方法选择的目的;1.等电点沉淀法;pH值对蛋白质荷电情况的影响

;蛋白质的滴定曲线

;沉淀方法:加酸

常用酸化剂:硫酸、盐酸、磷酸、草酸等;等电点沉淀法的特点;反应沉淀;5.反应沉淀法;常用的反应沉淀试剂;机理:加入的化学试剂与蛋白质结合形成难溶性的复合物沉淀。

应用:除去杂蛋白;

除去对提取和成品质量影响较大的无机离子杂质,

主要是Ca2+、Mg2+、Fe3+等高价金属离子;盐析沉淀;3.盐析沉淀法;盐析机理;常用的盐析剂;盐析的影响因素;盐析的影响因素;盐析的影响因素;有机溶剂沉淀;有机溶剂沉淀;常用的有机溶剂沉淀剂;有机溶剂沉淀的特点;溶剂选择;影响有机溶剂沉淀的主要因素;有机溶剂沉淀的主要影响因素有哪些?

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