药物色谱分离技术—凝胶色谱（制药技术课件）.pptx

色谱分离技术--凝胶色谱

凝胶色谱—色谱分离技术大纲1.凝胶色谱概念2.凝胶色谱分离原理3.凝胶色谱分类4.凝胶色谱特点

凝胶色谱—色谱分离技术凝胶色谱是利用固定相中的微孔，根据各组分分子大小的不同，来实现物质的分离，又称为凝胶过滤色谱、尺寸排阻色谱和空间排阻色谱或分子筛色谱。固定相为化学惰性多孔物质。（一）凝胶色谱概念

凝胶色谱—色谱分离技术凝胶色谱分离原理如图所示。柱内装有凝胶颗粒，凝胶颗粒内部具有多孔网状结构，当被分离的混合物流过色谱柱时，各组分分子存在两种运动，即垂直向下的移动和无定向的扩散运动。（一）凝胶色谱分离原理

凝胶色谱—色谱分离技术由于混合物中含有大、小不同的分子，在随流动相移动时，比凝胶孔径大的分子不能进入凝胶孔内，而是随流动相在凝胶颗粒之间的空隙向下移动，并最先被洗脱出来；比凝胶孔小的分子以不同的扩散程度进入凝胶颗粒的微孔内，使其向下移动的速度较慢，在色谱柱中逐渐将大分子物质拉开距离，最终达到分离的目的。（二）凝胶色谱分离原理

凝胶色谱—色谱分离技术凝胶色谱法主要用于分离分析相对分子质量较高（即2000）的化合物，如脱盐、分级分离和分子量的确定等。脱盐是分离大小不同的两类分子的操作，如无机盐与生物大分子。（三）凝胶色谱应用

凝胶色谱—色谱分离技术分级分离是将分子大小相近的物质分开。对于球形蛋白分子，在排斥极限和渗透极限之间，保留值与相对分子质量的对数之间存在线性关系，据此可测定相对分子质量。（三）凝胶色谱应用

凝胶色谱—色谱分离技术采用凝胶色谱法，能简便快速地对分子量相差较大的混合物进行分离；对于复杂的未知样品，可采用凝胶色谱法进行初步分级分离，无需进行复杂实验，就能获得样品组成分布方面较为全面的概况。（三）凝胶色谱应用

凝胶色谱—色谱分离技术凝胶色谱按其流动相的不同分为两大类：一类是水相系统，称为凝胶过滤色谱，其所用的凝胶是亲水性的，适用于分离水溶性化合物；另一类是有机相系统，称为凝胶渗透色谱，其所用的凝胶是疏水性的，适用于分离油溶性的化合物。（二）凝胶色谱分类

凝胶色谱—色谱分离技术作为固定相的凝胶，其材料性质、颗粒大小、孔径、机械强度、化学稳定性及其均一性等，都对凝胶色谱分离的效果有重要的影响。因此，凝胶的选择必须根据被分离物质分子的大小、形状和分离要求的不同，选用不同的凝胶，同时还要考虑凝胶颗粒的大小对流速、压强降和分离效果的影响。

凝胶色谱—色谱分离技术凝胶色谱分离的特点：①凝胶为惰性物质，不带电荷，不与溶质分子发生任何作用，因此分离条件温和；②应用范围广，可分离从几百到数百万分子量的分子；③设备简单，易于操作，周期短，凝胶一般不需要再生即可反复适用。在生物物质分离、制药生产和科研中被广泛应用。（四）凝胶色谱分离的特点