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高效液相色谱法
HPLC
三、分离系统
1）保护柱
•保护分析柱，挡住来源于样品和进样阀
垫圈的微粒；
•与分析柱填料相同，粒径大，易装填；
•5cm长，使用50-100次。
2）色谱柱
组成：柱管＋固定相
柱端：隔膜片，阻止固定相逸出或流动相、样品等
带入颗粒杂质
分析柱：内径2-4.6mm，柱长10-25cm
制备柱：内径20-40mm，柱长10-30cm
3）柱温箱
•精确控制柱温可以提高t的重现性；
R
•较高的柱温能增加样品在流动相的溶解度，缩短
分析时间；
•升高柱温能增加柱效、提高R；
•分析高分子化合物或黏度大的样品，高于室温；
•分析具有生物活性的生物分子，低于室温；
•常用柱温范围：室温－65℃
4)柱效评价
•中国药典（2015年版）规定：给出分析状态下
色谱柱的最小n，R，拖尾因子
谢谢
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