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选择题(每道题只有一个符合题意的选项)
1.(多选)下列有关基因工程工具的叙述,正确的是(????)
A.一种限制性内切核酸酶只能识别某种特定的脱氧核苷酸序列
B.E.coliDNA连接酶只能将具有互补黏性末端的DNA片段连接
C.限制性内切核酸酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶
D.新冠病毒(RNA病毒)可以作为基因工程的载体
【答案】AB
【分析】1、基因工程的工具:
(1)限制酶:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
(2)DNA连接酶:根据酶的来源不同分为两类:E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端,此外T4DNA连接酶还可以连接平末端,但连接平末端时的效率比较低。
(3)运载体:常用的运载体有质粒、噬菌体、动植物病毒等。
2、作为运载体必须具备的条件:①要具有限制酶的切割位点;②要有标记基因(如抗性基因);③能在宿主细胞中稳定存在并复制;④是安全的,对受体细胞无害,而且要易从供体细胞分离出来。
【详解】A、每种限制酶只能识别特定的脱氧核苷酸序列,并在特定位点进行切割,体现了酶的专一性,A正确;
B、根据酶的来源不同,DNA连接酶分为两类:E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端,此外T4DNA连接酶还可以连接平末端,B正确;
C、限制酶、DNA连接酶和质粒是基因工程常用的工具,其中限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶,C错误;
D、常用的运载体有质粒、噬菌体、动植物病毒等,而新冠病毒是RNA病毒,且对受体细胞可能有害,不安全,因此不能作为基因工程的载体,D错误。
2.与“限制性核酸内切酶”作用部位完全相同的酶是??????(???)
A.DNA连接酶B.RNA聚合酶C.反转录酶 D.解旋酶
【答案】A
【分析】解答本题的关键是掌握生物学中各种酶的作用对象,并与限制酶的作用对象做对比,进而得出正确答案。
【详解】A、限制性核酸内切酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且在特点部位切割磷酸二酯键断裂,形成黏性末端和平末端两种。DNA连接酶连接的是两个DNA片段之间的磷酸二酯键,作用于与限制性核酸内切酶相对的部位,A正确;
B、RNA聚合酶的作用是催化转录形成RNA,能形成RNA上的磷酸二酯键,而限制酶是作用于DNA上的磷酸二酯键,B错误;
C、反转录酶能催化反转录过程,但其作用部位不是磷酸二酯键,C错误;
D、DNA解旋酶能解开双链DNA,破坏的是碱基对之间的氢键,D错误。
3.我国华南农业大学科研人员利用农杆菌转化法将抗环斑病毒基因导入番木瓜,培育出转基因抗病番木瓜。下列叙述错误的是(????)
A.限制酶在Ti质粒切开一个切口暴露出两个游离的磷酸基团
B.不同的限制酶切割DNA产生的黏性末端一定不同
C.可以用同种限制酶切割Ti质粒和含有抗环斑病毒基因的DNA片段
D.T4DNA连接酶既能连接黏性末端,又能连接平末端
【答案】B
【分析】基因工程的工具:(1)限制酶:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。(2)DNA连接酶:连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。(3)运载体:常用的运载体有质粒(质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子)、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
【详解】A、限制酶可以识别特定的DNA序列并在特定位点进行切割,Ti质粒为环状DNA,故限制酶在Ti质粒切开一个切口暴露出两个游离的磷酸基团,A正确;
B、不同的限制酶切割形成的黏性末端也可能相同,也可能不同,B错误;
C、可以用同种限制酶切割Ti质粒(运载体)和含有抗环斑病毒基因(目的基因)的DNA片段,以形成相同的黏性末端,便于连接,C正确;
D、T4DNA连接酶既能连接黏性末端,又能连接平末端,只是连接平末端的效率较低,D正确。
4.下图是对某生物B基因进行基因编辑的过程,该过程中用sgRNA指引内切核酸酶Cas9结合到特定的靶位点。下列说法错误的是(????)
A.sgRNA能与靶基因上特定碱基序列互补
B.Cas9可特异性识别并断裂核苷酸之间的磷酸二酯键
C.基因突变是不定向的而基因编辑能定向改变基因
D.使用该项基因编辑技术来预防人的某些疾病时需经严格审查
【答案】B
【分析】用sgRNA可指引内切核酸酶Cas9结合到特定的切割位点并进行切割,进而在Ⅰ、Ⅱ之间和Ⅱ、Ⅲ之间切割,被剪下的Ⅱ被水解,Ⅰ和Ⅲ连接形成新的B基因。
【详解】A、sgRN
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