(35)--10.2 毛细管电泳分析法-电泳仪及分离模式.pdf

电泳仪的组成

毛细管电泳的分离模式

仪器的组成

1.仪器结构

主要由高压电源、电极、缓冲液池、进样系统、毛细管柱、检测器及数据处理

系统等组成。

仪器的组成

2.主要部件

（1）高压电源

a.0～30kV稳定、连续可调的直流电源；

b.具有恒压、恒流、恒功率输出；

c.电场强度程序控制系统；

d.电压稳定性：1%；

e.电源极性易转换。

仪器的组成

（2）电极和缓冲溶液池

a.电极通常是直径为0.5-1.0mm的铂丝；

b.缓冲液池通常是带螺口的小玻璃瓶或塑料瓶（1~5mL不等）。

仪器的组成

（3）毛细管和进样系统

a.材料：熔融石英，各项性能好；玻璃材质，光学、机械性能差。

b.规格：内径20～100μm，外径350～400μm。

电动进样、压力进样和扩散进样三种方式，进样量可以通过控制驱动力

的大小或时间长短来控制。

仪器的组成

（4）检测和数据处理系统

要求：具有极高灵敏度，可柱端检测；

分离模式

1.毛细管区带电泳capillaryzoneelectrophoresis，CZE

最基本、应用最广的分离模式

分离模式

2.毛细管凝胶电泳Capillarygelelectrophoresis，

CGE

将聚丙烯酰胺或琼脂等在毛细管柱内交联生成凝胶。

其具有多孔性，试样分子按体积（分子量）大小分

离的区带电泳技术。

蛋白质、DNA等分离较好的模式

分离模式

3.胶束电动毛细管色谱micellarelectrokineticcapillarychromatography，

MECC

（1）缓冲溶液中加入离子型表面活性剂，其浓度达到临界浓度，聚集成一

疏水内核，外部带负电的球形胶束。

（2）在电场力的作用下，胶束在柱中缓慢移动

（假固定相）。

适合中、小分子、中性化合物及药物的分离。

分离模式

4.毛细管等电聚焦Capillaryisoelectricfocusing，CIEF

（1）根据等电点差别分离生物大分子的高分辨率

电泳技术。

（2）毛细管内充有两性电解质，当施加直流电压

（6～8V）时，管内将建立一个由阳极到阴极逐步

升高的pH梯度。

氨基酸、蛋白质、多肽所带电荷与溶液pH有关

分离模式

5.毛细管等速电泳Capillaryisotachophoresis，CITP

（1）将两种淌度差别很大的缓冲液分别作为前导离子和尾随离子，试样离

子的淌度全部位于两者之间，并以同一速率移动。

（2）不同离子的淌度不同，所形成区带的电场强度不同（E=U/μ），淌度

大的离子区带电场强度小。

分离模式

（3）具有富集、浓缩作用，界面明显

沿出口到进口，将不同区带依次排序1，2，3，4…，电场强度依次增大。假设“2”

号中离子扩散到“3”号，该区电场强度大，离子被加速，返回到“2”区；当“2”

号中离子跑到“1”号区，离子被减速使之归队。

（4）不能同时对阴离子和阳离子进行分离

1，2，3，4…

分离模式

6.毛细管电色谱Capillaryelectrochromatography，CEC

在毛细管壁上键合或涂渍高效液相色谱的固定液或填充HPLC固定相

微粒，以电渗流为流动相，试样组分在两相间的分配为分离机理的电

动色谱过程，兼具HPLC和CE的优势。

小结

1.电泳仪的组成部分

2.毛细管电泳分离模式。