(32)--9.3 高效液相色谱法 -分离类型与原理2.pdf

离子对色谱

离子交换色谱

离子对色谱法

对强极性的有机酸和有机碱的分离？

将一种或多种与溶质离子电荷相反的离子加入到

流动相或固定相中，使其与溶质离子结合形成疏

水性的离子对化合物，从而控制溶质的保留行为

的一种色谱分离方法。

离子对色谱法

1.固定相和流动相

固定相：正相键合固定相；反相键合固定相。

流动相：一般含有适当有机反离子的溶剂。

烷基铵盐离子对试剂，用于阴离子的分离；

烷基磺酸盐离子对试剂，用于阳离子的分离。

离子对色谱法

2.分离原理

固定相为非极性键合相，流动相为水溶液，于流动相中加入与待测离子A+

-+−

电荷相反的离子B，形成疏水性离子对AB：

+−K+−

A+B疏水性

平衡常数：分配系数：

−

+−+−=K⋅[]

[][A]AB

K=+−=+

[][][]

核酸、核苷、儿茶酚胺类物质的分离

离子交换色谱

1.固定相和流动相

固定相：阴离子交换树脂或阳离子交换树脂；

流动相：盐类缓冲溶液（一定pH和离子强度）。

离子交换色谱

2.分离原理

基本原理：

组分在固定相上发生离子交换反应；组分

与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径、

电荷多少等有关。亲和力大，保留时间长。

-++-++

阳离子交换反应：R-SONa+M＝R-SOM+Na

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阴离子交换反应：R-NR3+Cl-＋X-＝R-NR3+X-＋Cl-

离子交换色谱

在离子交换色谱中，常通过改变流动相的pH、离子

强度等条件来控制分配比k，改变离子交换剂的选

择性，进而影响待测物的分离。

既适于无机离子，也适于有机物分离，如蛋白质、

氨基酸、核酸等。