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临床酶学检验技术;第一节酶学基本知识;●酶是蛋白质,具有一、二、三级结构,有些酶还具
有四级结构。
●单体酶(monomericenzyme)---只由一条多肽链构成
●寡聚酶(oligomericenzyme)---由多个相同或不同
亚基以非共价键连接的酶
●多酶体系(multienzymesystem)---由几种不同功能
的酶彼此聚合而成的多酶复合物
●酶的必需基团(essentialgroup)---与酶的活性密
切相关的基团
●酶的活性中心(activecenter)---组成具有能与底
物结合并起催化反应的特定空间结构区域;酶的命名、分类与编号;习惯用名英文缩写EC编号系统名
乳酸脱氢酶LD(LDH)1.1.1.27L乳酸:NAD+氧化还原酶
单胺氧化酶MAO1.4.3.4单胺:氧化还原酶
γ-谷氨酰转移酶γ-GT/GGT2.3.2.2γ-谷氨酰肽:氨基酸γ-谷氨酰转移酶
门冬氨酸氨基转移酶AST2.6.1.1L-门冬氨酸:α-酮戊二酸氨基转移酶
(谷草转氨酶)(GOT)
丙氨酸氨基转移酶ALT2.6.1.2L-丙氨酸:α-酮戊二酸氨基转移酶
(谷丙转氨酶)(GPT)
肌酸激酶CK2.7.3.2三磷酸腺苷:肌酸转磷酸酶
碱性磷酸酶ALP(AKP)3.1.3.1正磷酸单酯磷酸水解酶
;三、酶促反应动力学;(二)酶促反应进程;(三)酶动力学参数;(四)酶偶联反应;第二节血清酶变化的生理病理机制;二、血清酶变化的生理病理机制;
(一)酶活性单位
1.惯用单位
2.国际单位---在特定的条件下,一分钟内使底
物转变一微摩尔的酶量为一个国际单位。
3.Katal单位---在规定条件下,每秒钟催化转化
一摩尔底物的酶量。1katal=60×106U
;(二)酶活性浓度
指单位体积样品中的酶活性单位
(三)正常上限升高倍数(ULN)
是指用测得的酶活性结果除以参考范围上限;二、酶蛋白质量浓度表示法;第四节酶催化活性浓度测定的理论基础;(三)连续监测法的方法设计;第五节酶活性测定的影响因素与最适条件的确定;二、测定条件的影响与最适条件的确定;三、其他因素对测定结果的影响;第六节同工酶检测技术;
免疫抑制法利用同工酶的一种亚基与相应的抗
体结合后,酶活性受到抑制,测定加与不加抗体前后
样品中酶活性的变化,可以计算出该型同工酶的活性。
不加抗CK-MM血清时样品的CK活性:CK-MM和CK-MB活性;
加入抗CK-MM血清时样品的CK活性:50%CK-MB的活性;
加入抗CK-MM血清时样品的CK活性×2:CK-MB活性;
所测CK-MM和CK-MB之总活性-CK-MB活性=CK-MM活性。;第七节目前常用诊断酶的酶活性测定;L-丙氨酸+α-酮戊二酸α-丙酮酸+L-谷氨酸;二、肌酸激酶的测定;四、γ-谷氨酰基转移酶的测定;六、淀粉酶的测定
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