《给排水生化技术》课件——8.2水中细菌菌落总数的测定.pptxVIP

导语

同学们，水的微生物学检验在保证饮水安全上有着重要意义，主要包括菌落总数和总大肠菌数的检验，它们是评价水质状况的重要指标。GB5749《生活饮用水卫生标准》规定1mL自来水中细菌菌落总数不得超过100个。本次课我们来学习水中菌落总数的测定方法。

一、实验目的

二、实验原理

菌落总数是指1mL水样在营养琼脂培养基中于37℃培养24h后，所生长的细菌菌落总数。

三、实验器材

水样：自来水、水源水。

营养琼脂培养基。

灭菌水样瓶、无菌水（9mL）稀释管、灭菌培养皿、灭菌移液管，普通放大镜或菌落计数器、培养箱等。

四、实验步骤

1.采集自来水样

先将自来水龙头灼烧3min灭菌，再放水流出5~10min后，用灭菌水样瓶接取水样。

2.平板接种计数

用灭菌移液管吸取1mL水样，注入灭菌培养皿，再注入15mL45℃左右营养琼脂培养基混匀，做两个平行样。

另取一个空的灭菌培养皿，注入营养琼脂培养基做空白对照。

培养基凝固后，倒置于恒温培养箱内于37℃下培养24h。

用放大镜检查培养基表面或深处生成的菌落（像白色小点）并计数，两培养皿的平均菌落数即为1mL水样中的细菌总数。

四、实验步骤

3.水源水样的稀释

水源水一般含细菌较多，水样应在检验前先稀释。用灭菌吸管吸取1ml水样，注入盛有9mL无菌水的试管中摇匀，稀释度为10-1，如此类推，可连续稀释得到10-1、10-2、10-3、10-4......的一系列水样，视水样污染程度取最后的三个稀释度进行检验。本次水样采用10-1、10-2、10-33个稀释度。

四、实验步骤

4.水源水样接种和计数

取3个稀释度的水样各1mL，接种于培养基中放入培养箱，每个稀释度水样各做两个平行样，另做空白对照，操作方法与自来水样步骤相同。

用放大镜检查计数时，注意有较大片菌苔生长时，弃用；以无片菌苔生长的平皿计数。若片菌苔大小不到培养皿的一半，其余一半分布均匀，将此一半计数乘2。记录各培养皿菌落数后，计算同一稀释度的平均菌落数。

菌落总数以每个稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数得到，应选取平均菌落数在30～300之间的培养皿进行计算。

五、报告饮用水和水样水的菌落总数

2.据你的测定结果，自来水和水源水是否合乎水质标准？