玻璃器皿的清洗包扎干热灭菌及常见培养基配置湿热灭菌.pdfVIP

玻璃器皿的清洗包扎干热灭菌及常见培养基配置湿热灭菌

玻璃器皿的清洗、包扎和干热灭菌

一、目的要求

掌握玻璃器皿的清洗、包扎及干热灭菌的操作方法。

二、实验材料

玻璃器皿、烘箱、牛皮纸、纱布、纱绳

三、操作步骤

(一)清洗方法根据实验目的、器皿的种类、所盛放的物品、洗涤剂的类别和沾污程度

等的不同而有所不同。

1.新玻璃器皿的洗涤方法

新购置的玻璃器皿含游离碱较多，应在酸溶液内先浸泡数小时，酸溶液一般用2%的

盐酸或洗涤液，浸泡后用自来水冲洗干净。

2.使用过的玻璃器皿的洗涤方法

(1)试管、养皿、三角烧瓶、烧杯等可用瓶刷或海绵沾上肥皂或洗衣粉或去污粉等

洗涤剂刷洗，然后用自来水充分冲洗干净。但是，洗衣粉和去污粉较难冲洗干净，常在器

壁上附有

次以上充分冲洗，或可用稀盐酸摇洗一次，再用水冲洗。一层微小粒子，故要用水多

次甚至10

若内壁的水是均匀分布成一薄层，表示油垢完全洗净，若挂有水珠，则还需用洗涤液

浸泡数小时，然后再用自来水充分冲洗。

(2)装有固体养基的器皿应先将其刮去，然后洗涤。带菌的器皿在洗涤前先浸在

2%煤酚皂溶液(来苏尔)或0.25%新洁尔灭消毒液内24小时或煮沸半小时，再用上法洗涤

(3)载玻片与盖玻片用过的载玻片与盖玻片如滴有香柏油，要先用皱纹纸擦去或浸在二甲

苯内摇晃几次，使油垢溶解，再在肥皂水中煮沸5—10min，用软布或脱脂棉花擦试，

立即用自来水冲洗。然后在稀洗涤液中浸泡0.5—2h，自来水冲去洗涤液，最后用蒸馏

水换洗数次，待干后浸于95%酒精中保存备用。

3.洗涤液的配制与使用

(1)洗涤液的配制洗涤液分浓溶液与稀溶液两种，配方如下:

浓溶液重铬酸钠或重铬酸钾(工业用)50g

自来水150mL

浓硫酸(工业用)800mL

稀溶液重铬酸钠或重铬酸钾(工业用)50g

自来水850mL

浓硫酸(工业用)100mL

配法都是将重铬酸钠或重铬酸钾先溶解于自来水中，可慢慢加温溶解，冷却后徐徐加

入浓硫酸，边加边搅动。配好后的洗涤液应是棕红色或桔红色。贮存于有盖容器内。(2)

原理重铬酸钠或重铬酸钾与硫酸作用后形成铬酸，酪酸的氧化能力极强，因而此液具有

极强的去污作用。

(3)使用注意事项(a)洗涤液中的硫酸具有强腐蚀作用，玻璃器皿浸泡时间太长，会使

玻璃变质，因此切忌到时忘记将器皿取出冲洗。其次，洗涤液若沾污衣服和皮肤应立即用

水洗，再用苏打水或氨液洗。如果溅在桌椅上，应立即用水洗去或湿布抹去;(b)玻璃器皿

投入前，

应尽量干燥，避免洗涤液稀释;(c)此液的使用限于玻璃和瓷质器皿，不适用于金属

和塑料器皿;(d)有大量有机质的器皿应先行擦洗，然后再用洗涤液，这是因为有机质过

多，会加快洗涤液失效，此外，洗涤液虽为很强的去污剂，但也不是所有的污迹都可清

除;(e)盛洗涤液的容器应始终加盖，以防氧化变质;(f)洗涤液可反复使用，但当其变为墨绿

色时即已失效，不能再用。

(二)空玻璃器皿的包扎

1.养皿的包扎

养皿常用旧报纸密密包紧，一般以5—8套养皿作一包，少于5套工作量太大，

多

于8套不易操作。

2.吸管的包扎

准备好干燥的吸管，在距其粗头顶端约0.5cm处，塞一小段约1.5cm长的棉花，

以免

使用时将杂菌吹入其中，或不慎将微生物吸出管外。棉花要塞得松紧恰当，过紧，吹

吸

液体太费力;过松，吹气时棉花会下滑。然后分别将每支吸管尖端斜放在旧报纸条的

近

左端，与报纸约呈45度角，并将左端多余的一段纸覆折在吸管上，再将整根吸管卷

入

报纸，右端多余的报纸打一小结。如此包好的很多吸管可再用一张大报纸包好，进行

干

热灭菌。

3.试管和三角烧瓶等的包扎

试管管口和三角烧瓶瓶口塞以棉花塞，然后在棉花塞与管口和瓶口的外面用两层报纸

(不可用油纸)与细线包扎好，进行干热灭菌。试管塞好棉花塞后也可一起装在铁丝篓

中，

用大张报纸将一篓试管口做一次包扎，包纸的目的在于保存期避免灰尘侵入。

空的玻璃器皿一般用干热灭菌，若需湿热灭菌，则要多用几层报纸包扎，外