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海西黑枸杞多糖酶法提取工艺研究及其体外抗氧化性分析
汇报人：
2024-01-24
引言
材料与方法
海西黑枸杞多糖酶法提取工艺研究
体外抗氧化性分析
结果与讨论
结论与展望
contents
目
录
引言
01
03
推动海西黑枸杞产业发展
研究海西黑枸杞多糖酶法提取工艺，有助于提高产品质量和附加值，推动海西黑枸杞产业发展。
01
枸杞多糖的生物活性
枸杞多糖具有多种生物活性，包括抗氧化、抗炎、抗肿瘤等，对人体健康有重要作用。
02
酶法提取的优势
与传统的热水提取相比，酶法提取具有条件温和、提取率高、节能环保等优点。
酶的选择与用量
根据多糖的结构特点选择合适的酶种和用量，常用的酶有纤维素酶、果胶酶等。
提取条件优化
通过单因素实验和正交实验等方法，优化酶解温度、时间、pH等条件，提高多糖的提取率。
提取液处理与多糖纯化
对酶解后的提取液进行离心、过滤等处理，去除杂质，得到粗多糖。进一步采用透析、超滤等方法对粗多糖进行纯化，得到纯化的多糖。
材料与方法
02
酶制剂
选用食品级复合酶制剂，包括纤维素酶、果胶酶等。
海西黑枸杞
采自青海省海西蒙古族藏族自治州，经鉴定为茄科枸杞属黑果枸杞。
试剂
葡萄糖、苯酚、硫酸、无水乙醇、DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）、ABTS（2,2-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）等，均为分析纯。
紫外可见分光光度计
用于测定多糖含量和抗氧化性指标。
旋转蒸发仪
用于浓缩酶解液。
离心机
用于分离酶解液中的固体和液体成分。
粉碎机
用于将黑枸杞粉碎成粉末。
恒温水浴锅
用于控制酶解反应的温度。
黑枸杞多糖的提取
01
称取适量黑枸杞粉末，加入一定比例的复合酶制剂，在恒温水浴锅中进行酶解反应。反应结束后，离心分离固体和液体成分，得到黑枸杞多糖粗提液。
多糖的纯化与浓缩
02
将粗提液进行旋转蒸发浓缩，得到多糖浓缩液。随后进行醇沉处理，得到多糖沉淀。将沉淀复溶后进行透析处理，以去除小分子杂质。最后再次进行浓缩和干燥处理，得到纯化的黑枸杞多糖。
多糖含量测定
03
采用苯酚-硫酸法测定多糖含量。以葡萄糖为标准品，绘制标准曲线。将待测样品与苯酚、硫酸混合后沸水浴加热，冷却后在紫外可见分光光度计上测定吸光度值，根据标准曲线计算多糖含量。
海西黑枸杞多糖酶法提取工艺研究
03
针对海西黑枸杞多糖的结构特点，选用适合的酶种类进行酶解，如纤维素酶、果胶酶等。
酶种类的选择
酶解pH值的确定
酶解时间的控制
通过试验确定最适pH值，使酶在最佳活性状态下进行多糖的酶解。
根据酶的活性特点和多糖的结构，控制酶解时间以获得最佳的多糖得率。
03
02
01
在较短时间内进行多糖的提取，观察多糖得率的变化情况。
短时间提取
延长提取时间，探究多糖得率是否随时间增加而提高。
长时间提取
分析不同提取时间下多糖的结构变化，以评估提取时间对多糖活性的影响。
提取时间对多糖结构的影响
低温提取
在较低温度下进行多糖的提取，观察多糖得率的变化情况。
温度对多糖结构的影响
分析不同温度下多糖的结构变化，以评估温度对多糖活性的影响。
高温提取
提高提取温度，探究多糖得率是否随温度升高而增加。
低酶用量
使用较少的酶进行多糖的提取，观察多糖得率的变化情况。
酶用量对多糖结构的影响
分析不同酶用量下多糖的结构变化，以评估酶用量对多糖活性的影响。
高酶用量
增加酶的用量，探究多糖得率是否随酶用量增加而提高。
体外抗氧化性分析
04
DPPH自由基清除率计算
通过测定样品与DPPH自由基反应后的吸光度变化，计算清除率，以评价黑枸杞多糖对DPPH自由基的清除能力。
清除效果比较
将不同浓度黑枸杞多糖的DPPH自由基清除率与VC等阳性对照进行比较，分析黑枸杞多糖的清除效果。
还原力测定原理
利用黑枸杞多糖在碱性条件下将铁氰化钾还原成亚铁氰化钾，再与三氯化铁反应生成普鲁士蓝，通过测定普鲁士蓝的吸光度来评价黑枸杞多糖的还原力。
还原力比较
将不同浓度黑枸杞多糖的还原力与VC等阳性对照进行比较，分析黑枸杞多糖的还原能力。
黑枸杞多糖中的羧基、羟基等官能团可以与金属离子发生螯合反应，形成稳定的螯合物，从而降低金属离子的活性。
金属离子螯合原理
通过测定不同浓度黑枸杞多糖对亚铁离子的螯合率，并与EDTA等阳性对照进行比较，分析黑枸杞多糖的金属离子螯合能力。
螯合能力比较
结果与讨论
05
酶解时间对多糖提取率的影响
随着酶解时间的延长，多糖提取率逐渐增加，但当酶解时间超过一定范围后，提取率反而下降，可能是由于酶活力的降低或底物的消耗。
酶用量对多糖提取率的影响
在一定范围内，随着酶用量的增加，多糖提取率逐渐提高。但当酶用量过高时，提取率增加不明显，甚至有所下降，可能是由于底物浓度相对不足或酶的竞争性抑制。
温度对多糖提取率的影响
在一定温度范
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