酶以及酶促反应.ppt

肝脏疾病的诊断急性肝炎患者在黄疸前期，血清中转氨酶（ALT，AST）活性就已明显增高γ-谷氨酰基转移酶（GGTP），碱性磷酸酶（ALP）指标都可以用于诊断多种肝病GGTP和ALP同工酶测定有辅助诊断肝癌作用第117页,共133页，星期六，2024年，5月心血管疾病的酶学检测肌酸磷酸激酶（CK或CPK）：参考范围0－190IU/L天冬氨酸氨基转移酶（AST）：参考范围0－40IU/L乳酸脱氢酶（LDH）：参考范围114－240IU/L第118页,共133页，星期六，2024年，5月肿瘤的酶学诊断端粒酶与肿瘤诊断酸性磷酸酶：由前列腺分泌，前列腺癌时可见血清酸性磷酸酶增高。乳酸脱氢酶（LDH）：肝癌及恶性淋巴瘤有不同程度的增高。5一核苷酸磷酸二酯酶同工酶和γ一谷酰胺转移酶Ⅱ（GGT-Ⅱ）：原发或转移性肝癌时可增高。第119页,共133页，星期六，2024年，5月糖尿病的酶学诊断谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab)检测

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)对糖尿病肾病早期诊断具有重要的辅助价值。第120页,共133页，星期六，2024年，5月急性胰腺炎的酶学诊断脂肪酶和淀粉酶急剧升高。第121页,共133页，星期六，2024年，5月神经系统疾病的酶学诊断酸性磷酸酶增高可见于脑萎缩、脑肿瘤、脑膜炎及多发性硬化等。核糖核酸酶（RNase）增高见于癫痫、脑肿瘤、痴呆、脱髓鞘性疾病及脑膜炎等。多巴胺-β-羟化酶（DβH）精神分裂症患者血中DβH活性增高，而老年性痴呆患者CSF中DβH活性降低。蛋白酶及鸟嘌呤酶增高见于多发性硬化。乙酰胆碱酯酶（AchE）及假胆碱酯酶（BchE）Alzheimer病患者脑脊液中AchE活性降低，但血浆及脑脊液中BchE活性增高。癫痫患者血清AchE显著增高。β-葡萄糖苷酶增高见于脱髓鞘性疾病、糖尿病性神经病、癫痫、脑肿瘤及细菌性脑膜炎等。第122页,共133页，星期六，2024年，5月酶与疾病的治疗通过引入或者抑制酶的活性来有针对性的对不同疾病进行治疗第123页,共133页，星期六，2024年，5月酶类药物在心脑血管疾病治疗中的应用

酶类药物包括尿激酶、蝮蛇抗栓酶、蚓激酶、降纤酶等第124页,共133页，星期六，2024年，5月酶抑制剂在疾病治疗中的作用磷酸二酯酶4抑制剂在肺疾病中的治疗血管紧张素转化酶抑制剂在慢性冠状动脉疾病中的治疗磷酸二酯酶抑制剂在过敏性疾病治疗第125页,共133页，星期六，2024年，5月二、酶在医学上的其他应用（一）酶作为试剂用于临床检验和科学研究1．酶法分析即酶偶联测定法(enzymecoupledassays)，是利用酶作为分析试剂，对一些酶的活性、底物浓度、激活剂、抑制剂等进行定量分析的一种方法。第126页,共133页，星期六，2024年，5月荧光素酶报告基因检测是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光(bioluminescence)。然后可以通过荧光测定仪也称化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光。

????通过荧光素和荧光素酶这一生物发光体系，可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。通常把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在luciferase的上游或其他适当的地方，构建成报告基因质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断刺激前后或不同刺激对感兴趣的调控元件的影响。

第127页,共133页，星期六，2024年，5月酶联吸附免疫法(ELISA)原理是将特异性抗体结合到固相载体上形成固相抗体，然后和待检血清中的相应抗原结合形成免疫复合物，洗涤后再加酶标记抗体，与免疫复合物中抗原结合形成酶标抗体-抗原-固相抗体复合物，加底物显色，判断抗原含量。第128页,共133页，星期六，2024年，5月辣根过氧化物酶在WesternBlot检测蛋白中的应用原理：利用特异的第一抗体与目标蛋白结合，再用辣根过氧化物酶标记的第二抗体与第一抗体相结合，加以底物显色来反映检测蛋白的强度。第129页,共133页，星期六，2024年，5月2．酶标记测定法酶可以代替同位素与某些物质相结合，从而使该物质被酶所标记。通过测定酶的活性来判断被标记物质或与其定量结合的物质的存在和含量。3．工具酶除上述酶偶联测定法外，人们利用酶具有高度特异性的特点，将酶做为工具，在分子水平上对某些生物大分子进行定向