3.1 重组DNA技术的基本工具 课件 高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

第3章基因工程

1.基因是什么？2.基因的功能是什么？基因通过控制蛋白质的合成，直接或间接控制生物的性状。转录DNAmRNA蛋白质翻译（RNA聚合酶）——体现相关的生物性状知识回顾——基因基因通常是有遗传效应的DNA片段。

①DNA中文全称:②组成元素:③基本单位:脱氧核糖核酸CHONP脱氧核糖核苷酸=磷酸+脱氧核糖+含氮碱基1′4′3′2′5′ATGC脱氧核苷酸(4种)知识回顾——DNA鸟嘌呤脱氧核苷酸胞嘧啶脱氧核苷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸腺嘌呤脱氧核苷酸脱氧核糖含氮碱基磷酸OH脱氧核苷酸如何连接成脱氧核苷酸链的呢？

脱氧核糖TP磷酸二酯键脱氧核糖CP脱氧核糖AP脱氧核糖GP氢键AP脱氧核糖CP脱氧核糖TP脱氧核糖GP脱氧核糖5′3′5′3′5′5′3′3′OHOH

DNA的结构特点：5’3’3’5’②和交替连接，排列在外侧，构成；排列在内侧。③两条链上的碱基通过连接成碱基对，且遵循。①DNA是由两条单链组成的，这两条链按方式盘旋成双螺旋结构。反向平行脱氧核糖磷酸碱基基本骨架氢键碱基互补配对原则简图：①磷酸二酯键②氢键……ATGCCGTGGAATTCC…………TACGGCACCTTAAGG……①②

抗虫棉的培育苏云金杆菌毒蛋白基因毒蛋白杀死害虫棉花细胞基因工程的概念是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫重组DNA技术。操作环境及操作对象原理操作水平结果体外环境；基因分子水平基因重组赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品目的基因受体细胞目的基因的表达产物

理论基础1.DNA的基本组成单位相同（四种脱氧核苷酸）2.都遵循碱基互补配对原则3.DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构理论基础1.基因是控制生物性状的结构与功能单位2.遗传信息的传递都遵循中心法则3.生物界几乎共用一套遗传密码

3.1重组DNA技术的基本工具

限制性内切核酸酶——“分子手术刀”来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的你能根据所掌握的知识，推测限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么吗?原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，所以它在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制。限制酶就是它的一种防御性工具。当外源DNA入侵时，它会利用限制酶来切割外源DNA，使之失效，以保证自身的安全。

3.命名：粘质沙雷氏杆菌（Serratiamarcesens）大肠杆菌（EscherichiacoliR）EcoRⅠ限制酶SmaⅠ限制酶2.种类：数千种（限制酶不是一种酶，而是一类酶）

3、作用：能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列专一性，识别序列的特点：1.大多数识别序列由6个核苷酸组成，也有少数由4个，8个或其他数量的核苷酸组成。限制酶都可以找到一条中心轴线。中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的，称为回文序列。2.一条链从5’往3’读的碱基顺序与另一条链从5’往3’读的顺序完全一致。EcoRⅠ5’…G-A-A-T-T-C…3’3’…C-T-T-A-A-G…5’SmaⅠ5’…C-C-C-G-G-G…3’3’…G-G-G-C-C-C…5’BamHⅠ5’…G-G-A-T-C-C…3’3’…C-C-T-A-G-G…5’TaqⅠ5’……T-C-G-A……3’3’……A-G-C-T……5’

限制酶G1’2’3’4’5’1’2’3’4’5’A磷酸二酯键TGCCGTAA4、作用部位:特定部位上的磷酸二酯键EcoRⅠ5’…G-A-A-T-T-C…3’3’…C-T-T-A-A-G…5’

EcoRⅠ(在G与A之间切割)中轴线黏性末端产生黏性末端或平末端5.切割结果：当限制酶在它识别序列的___中轴线两侧________将DNA分子的两条链分别切开时，产生的是___黏性末端_______；当限制酶在它识别序列的__中轴线处_____切开时，产生的是_平末端____；中轴线平末端SamⅠ(在G与C之间切割)

限制酶存在于原核生物中的作用是什么?原核生物容易受到外源DNA的入侵限制酶的作用:切割外源DNA,使之失效保证自身的安全限制酶为什么不会剪切原核生物本身的DNA?DNA分子中不具备这种限制酶的识别切割序列，或者DNA分子被修饰（甲基化），使限制酶不能将其切开【思考】

（1）实例1——Ec