以肿瘤细胞PLK1为药靶的抗癌重组腺病毒的构建及用途.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN1552877A

(43)申请公布日2004.12.08

(21)申请号C2

(22)申请日2003.06.05

(71)申请人深圳市奥尼克斯基因技术有限公司

地址518057广东省深圳市高新区南区R3栋B座710室

(72)发明人周剑峰马丁卢运萍王世宣陈刚高庆蕾

(74)专利代理机构

代理人

(51)Int.CI

C12N15/861

C12N7/01

C12N15/64

C12N15/33

C12N5/10

A61K48/00

A61P35/00

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

以肿瘤细胞PLK1为药靶的抗癌重

组腺病毒的构建及用途

(57)摘要

本发明公开了一种人工改造人类5

型腺病毒(ADV5)的构建方案，以及用该方

案获取的重组腺病毒构建体在肿瘤治疗的

具体用途。用PCR扩增定点缺失、同源重

组、转染、腺病毒单克隆纯化等技术，获

得一种重组腺病毒构建体，其特征在于：

ADV5基因组E1A保守序列2(CR2)编码序

列24个碱基缺失；ADV5E3区28532－

29360nt缺失；并在该区域反向插入部分

PLK1cDNA片段。该重组腺病毒构建体能

选择性地在肿瘤细胞内复制增殖；插入的

反义PLK1cDNA片段在肿瘤细胞内特异性

表达；对肿瘤细胞具有强效旁观者效应。

从而特异性杀灭肿瘤细胞，同时对正常细

胞无杀灭效应。该构建体在肿瘤治疗药

物、诊断试剂的制备中具有独特的实用价

值，同时也为肿瘤基因治疗提供了理想的

基因靶点特异性治疗应用途径。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

2021-03-19文件的公告送达文件的公告送达

2020-09-18文件的公告送达文件的公告送达

2007-09-19地址不明的通知地址不明的通知

2006-08-30授权授权

2005-02-09实质审查的生效实质审查的生效

2004-12-08公开公开

2021-08-13未缴年费专利权终止未缴年费专利权终止

权利要求说明书

Claim1.一种重组腺病毒构建体，其命名及技术特征在于：该构建体命名为

Δ923-946ADV5/ASPLK1，它缺失了ADV5923-946nt序列

CTTACCTGCCACGAGGCTGGCTTT，该序列编码E1A蛋白122至129位氨基

酸，同时，它缺失了ADV5E3区28532-29360nt，在该缺失区域引入一个ClaI酶

切位点，并在ClaI酶切位点中反向插入相当于PLK1mRNA的960-161nt的cDNA

片段，其他基因组结构与野生型ADV5完全相同。

Claim2.构建权利要求1所述的重组腺病毒构建体的方法，其特征在于：用PCR

扩增定点缺失技术缺失pXC1质粒中E1A的编码区923-946nt序列

CTTACCTGCCACGAGGCTGGCTTT，组成新的载体Δ