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大叶千斤拔多糖的超声波提取工艺及其抗氧化抑菌活性研究

汇报人：

2024-02-02

目录

contents

引言

材料与方法

结果与分析

讨论

结论与展望

01

引言

天然产物多糖的生物活性研究日益受到关注，大叶千斤拔作为一种传统中药材，其多糖成分具有潜在的药用价值。

超声波提取技术作为一种新型、高效的提取方法，在天然产物多糖的提取中具有广泛的应用前景。

研究大叶千斤拔多糖的超声波提取工艺及其抗氧化抑菌活性，对于开发大叶千斤拔的药用资源和拓展超声波提取技术的应用领域具有重要意义。

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大叶千斤拔（Flemingiamacrophylla）为豆科千斤拔属植物，分布于我国南方地区，具有清热解毒、祛风利湿等功效。

多糖是大叶千斤拔的主要活性成分之一，具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化等多种生物活性。

目前关于大叶千斤拔多糖的研究主要集中在其提取工艺和药理作用方面，但对其抗氧化抑菌活性的研究相对较少。

超声波提取技术是利用超声波的空化作用、机械效应和热效应等原理，加速天然产物中有效成分的溶出和扩散，从而提高提取效率。

相比传统提取方法，超声波提取技术具有提取时间短、提取率高、操作简便等优点。

目前，超声波提取技术已广泛应用于中药、食品、化工等领域的天然产物提取过程中。

02

材料与方法

采集新鲜、健康的大叶千斤拔植株，洗净、晾干后备用。

大叶千斤拔

乙醇、丙酮、无水葡萄糖、苯酚、浓硫酸等均为分析纯。

试剂

超声波清洗器

真空干燥箱

恒温摇床

用于提取大叶千斤拔多糖。

用于干燥多糖样品。

用于抑菌实验。

多糖提取

采用超声波辅助提取法，将大叶千斤拔粉末与蒸馏水按一定比例混合，置于超声波清洗器中，设定提取温度、时间和功率，提取结束后过滤得到提取液。

将提取液浓缩后，加入乙醇沉淀多糖，离心分离后得到粗多糖。再用丙酮、无水乙醇等有机溶剂进行洗涤，得到纯化后的多糖样品。

采用苯酚-硫酸法测定多糖含量，以无水葡萄糖为标准品制作标准曲线。

通过测定多糖对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除率，评价其抗氧化活性。

采用琼脂扩散法，以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为指示菌，观察多糖的抑菌效果。

多糖纯化

抗氧化实验

抑菌实验

多糖含量测定

03

结果与分析

超声波功率影响

实验结果显示，随着超声波功率的增加，大叶千斤拔多糖的提取率呈现先上升后下降的趋势，表明适中的超声波功率有利于多糖的提取。

提取时间影响

在超声波功率一定的条件下，随着提取时间的延长，多糖提取率逐渐增加，但过长的提取时间可能导致多糖结构破坏，因此需选择合适的提取时间。

料液比影响

实验结果表明，料液比对多糖提取率也有显著影响，过低的料液比可能导致提取不充分，而过高的料液比则可能增加后续浓缩和纯化的难度。

多糖含量测定

采用苯酚-硫酸法测定大叶千斤拔多糖的含量，结果显示其多糖含量较高，具有良好的开发价值。

单糖组成分析

通过气相色谱-质谱联用技术对大叶千斤拔多糖的单糖组成进行分析，发现其主要由葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等单糖组成。

实验结果显示，大叶千斤拔多糖具有较强的清除DPPH自由基能力，且清除率随着多糖浓度的增加而提高。

清除DPPH自由基能力

通过还原力实验发现，大叶千斤拔多糖具有一定的还原能力，可以还原铁氰化钾为亚铁氰化钾，进一步证实其抗氧化活性。

还原力测定

抑菌圈实验

采用抑菌圈实验法评价大叶千斤拔多糖对常见病原菌的抑制作用，结果显示其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等具有一定的抑菌效果。

最小抑菌浓度测定

通过最小抑菌浓度实验发现，大叶千斤拔多糖对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的最小抑菌浓度分别为1.0mg/mL和2.0mg/mL，表明其对不同病原菌的抑菌效果存在差异。

04

讨论

超声波功率

功率大小直接影响空化效应的强度，进而影响多糖的提取效率。

提取时间

提取时间过长可能导致多糖结构破坏，时间过短则提取不充分。

料液比

料液比过大或过小都会影响多糖的提取率和纯度。

温度

适当提高温度有助于多糖的溶解和扩散，但过高温度可能导致多糖降解。

化学结构

大叶千斤拔多糖的化学结构复杂，包括单糖组成、糖苷键类型、分支度等，这些结构特点决定了其生物活性。

分子量

多糖的分子量与其生物活性密切相关，不同分子量的多糖可能具有不同的抗氧化、抑菌等活性。

空间构象

多糖的空间构象对其生物活性也有影响，不同的空间构象可能导致多糖与受体结合的能力不同。

抗氧化机制

大叶千斤拔多糖可能通过清除自由基、提高抗氧化酶活性等途径发挥抗氧化作用。

抑菌机制

多糖可能通过破坏细菌细胞壁、抑制细菌酶活性、干扰细菌代谢等途径发挥抑菌作用。同时，多糖的抑菌活性可能还与其免疫调节作用有关，通过增强机体免疫功能来抵抗细菌感染。

05

结论与展望

01

大叶千斤拔多糖的超声波提取工艺相比传统方法具有更高的