PCR引物设计的原则.docx

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PCR引物设计的原则

引物设计有3条根本原则:首先引物与模板的序列要严密互补,其次引物与引物之间避开形成稳定的二聚体或发夹构造,再次引物不能在模板的非目的位点引发DNA聚合反响(即错配)。

具体实现这3条根本原则需要考虑到诸多因素,如引物长度〔primerlength〕,产物长度〔productlength〕,序列Tm值(meltingtemperature),引物与模板形成双链的内部稳定性(internalstability,用G值反映),形成引物二聚体(primerdimer)及发夹构造〔duplexformationandhairpin〕的能

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