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Q-PCR常见问题及解决方法.docx

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    QPCR

    QPCR常见问题及其分析解决方法

    一般来讲，进展real-timeqPCRMasterMix都是2×的浓缩液，只需要参加模板和引物就可以。由于real-timeqPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进展统计分析。通常来讲，反响体系的引物终浓度为100-400mM；模板假设是总RNA一般是10ng-500，假设cDNA，通常状况下是1ul或者1ul的10倍稀释液，要依据目的基因的表达丰度进展调整。固然这些都是阅历值，在操作过程中，还

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