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逍遥散干预慢性温和性不可预知应激大鼠盲肠菌群及组织研究

汇报人：

2024-01-15

引言

材料与方法

结果与分析

讨论

结论与展望

contents

目

录

01

引言

近年来，慢性应激对肠道微生态的影响逐渐受到关注，肠道菌群的平衡与应激反应密切相关。

慢性应激与肠道微生态

逍遥散作为中医经典方剂，具有疏肝解郁、调和气血的功效，对慢性应激引起的肠道菌群紊乱具有潜在的调节作用。

逍遥散的药理作用

通过探讨逍遥散对慢性温和性不可预知应激大鼠盲肠菌群及组织的影响，为中医药在应激相关肠道疾病治疗中的应用提供实验依据。

研究意义

国内外研究现状

目前，关于慢性应激对肠道微生态的研究主要集中在应激对肠道菌群多样性、组成及功能的影响方面。同时，逍遥散作为经典中药方剂，其在调节肠道菌群平衡、改善肠道功能方面的作用也逐渐受到关注。

发展趋势

随着高通量测序技术的发展，未来对肠道微生态的研究将更加深入。同时，结合多组学技术，从基因、蛋白、代谢等多层面揭示应激与肠道微生态的相互作用机制将成为研究热点。此外，基于肠道菌群与宿主互作的研究，将为中医药在肠道微生态调节领域的应用提供更多思路和方法。

本研究旨在探讨逍遥散对慢性温和性不可预知应激大鼠盲肠菌群及组织的影响，揭示逍遥散调节肠道菌群平衡的作用机制，为中医药在应激相关肠道疾病治疗中的应用提供实验依据。

研究目的

采用慢性温和性不可预知应激模型，观察逍遥散对应激大鼠盲肠菌群多样性、组成及功能的影响；运用分子生物学技术，检测盲肠组织中炎症因子、神经递质等相关指标的变化；结合病理组织学检查，评估逍遥散对盲肠组织的保护作用。

研究内容

02

材料与方法

选用健康成年雄性SD大鼠，体重180-220g，由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供。

将大鼠随机分为正常对照组、模型组、逍遥散低剂量组、逍遥散中剂量组、逍遥散高剂量组，每组10只。

分组

实验动物

药品

逍遥散，由柴胡、当归、白芍、白术、茯苓、甘草、生姜、薄荷组成，购自北京同仁堂（集团）有限责任公司，批号140921。

试剂

DNA提取试剂盒、PCR扩增试剂盒、凝胶回收试剂盒等，均购自天根生化科技（北京）有限公司。

造模方法

采用慢性温和性不可预知应激（CUMS）方法建立大鼠抑郁模型，包括断食、断水、倾斜鼠笼、潮湿垫料、昼夜颠倒等刺激，每天随机安排一种，持续21天。

给药方法

从造模第1天开始，逍遥散低、中、高剂量组分别给予逍遥散0.75g/kg、1.5g/kg、3.0g/kg灌胃，正常对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃，每天1次，连续21天。

样本采集

实验结束后，各组大鼠禁食不禁水12h，称重后断头处死，迅速取盲肠内容物和组织样本，置于-80℃冰箱保存备用。

使用QIIME2软件对盲肠菌群16SrRNA基因测序数据进行质量控制和初步分析，包括去除低质量序列、去除嵌合体序列等步骤。

数据处理

采用SPSS22.0软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（x±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析（One-wayANOVA），组间两两比较采用LSD-t检验。以P0.05为差异有统计学意义。

统计分析

03

结果与分析

逍遥散组大鼠盲肠菌群的Alpha多样性显著高于模型组，表明逍遥散能够提高菌群多样性。

Alpha多样性

基于Beta多样性分析，逍遥散组与模型组大鼠盲肠菌群结构存在显著差异。

Beta多样性

门水平

在门水平上，逍遥散组大鼠盲肠菌群中厚壁菌门和拟杆菌门的相对丰度较模型组显著增加。

属水平

在属水平上，逍遥散组大鼠盲肠菌群中乳酸杆菌属和双歧杆菌属的相对丰度较模型组显著增加。

VS

通过相关性分析发现，盲肠菌群中某些特定菌属的相对丰度与慢性温和性不可预知应激呈显著负相关。

菌群与组织病变相关性

进一步分析显示，盲肠菌群中某些益生菌属的相对丰度与盲肠组织病变程度呈显著负相关，提示这些益生菌可能对改善应激引起的肠道病变具有积极作用。

菌群与应激相关性

04

讨论

逍遥散干预后，大鼠盲肠菌群多样性显著增加，表明逍遥散对肠道菌群具有调节作用。

菌群多样性增加

有益菌增多

病原菌减少

逍遥散可促进大鼠盲肠中有益菌的生长，如乳酸菌、双歧杆菌等，有助于维持肠道微生态平衡。

逍遥散可抑制大鼠盲肠中病原菌的生长，如大肠杆菌、沙门氏菌等，有助于降低肠道感染风险。

03

02

01

减轻组织损伤

逍遥散可减轻慢性温和性不可预知应激大鼠的肠道组织损伤，促进肠道黏膜修复。

降低炎症反应

逍遥散可降低大鼠肠道组织的炎症反应，减少炎症因子的释放，有助于缓解肠道炎症。

改善肠道屏障功能

逍遥散可改善大鼠肠道屏障功能，增强肠道黏膜的防御能力，有助于维持肠道健康。

菌群失调与组织病变

慢性温和性不可预知应激可导致大鼠盲肠菌群失调，进而引发肠道组织病变。

本研究首