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细胞因子的检测方法

细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白

物质的统称。在免疫应答过程中，细胞因子在免疫调整、炎症应答、

肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是

基础免疫讨论的有较手段，同时在临床疾病诊断、病程观看、疗效

推断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。

但是，由于细胞因子在体内的含量甚微，给细胞因子的检测带来

困维，细胞因子的检测尚未在临床诊断上广泛开展，已知目前采纳

的细胞因子检测方法均不完善，且不同的检测方法所得的结果差异

较大，给临床诊断与治疗带来肯定的困难。因此，有必要了解各种

检测方法的特性及影响因素。

目前，细胞因子生物学活性检测和浓度测定方法主要有以下几类

一.生物学检测法

生物学检测又称生物活性检测，是依据细胞因子特定的生物活性

而设计的检测法。由于各种细胞因子具有不同的活性，例如IL-2促

进淋巴细胞增殖，TNF杀伤肿瘤细胞，CSFci激造血细胞集落形成，

IFN爱护细胞免受病毒攻击，因此选择某一细胞因子独特的生物活

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性，即可对其进行检测。生物活性检测法又可分为以下几类：

1．细胞增殖法

很多细胞因子具有细胞生zhang因子活性，特殊是白细胞介素，

如IL-2ci激t细胞生zhang、IL-3ci激肥大细胞生zhang、

IL-6ci激浆细胞生zhang等。利用这一特性，现已筛选出一些对

特定细胞因子起反应的细胞，并建立了只依靠于某种因子的细胞系，

即依靠细胞株(简称依靠株)。这些依靠株在通常状况下不能存活，

只有在加入特定因子后才能增殖。例如IL-2依靠株ctll-2在不含

IL-2的培育基中很快死亡，而加入IL-2后则可右体外zhang期

培育。在肯定浓度范围内，细胞增殖与IL-2量呈正比，因此通过测

定细胞增殖状况(如使用3h-tdr掺入法、MTT法等)鉴定IL-2的含

量。除依靠株外，还有一些短期培育的细胞，如胸腺细胞、骨髓细

胞、促有丝分裂原ci激后的淋巴母细胞等，均可作为靶细胞来测

定某种细胞因子活性。

2．靶细胞杀伤法

是依据某些细胞因子(如TNF)能在体外杀伤靶细胞而设计的检测

方法。通常靶细胞多选择体外zhang期传代的肿瘤细胞株，利用

同位素释放法或染料染色等方法判定细胞的杀伤率。

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3．细胞因子诱导的产物分析法

某些细胞因子可ci激特定细胞产生生物活性物质，如IL-2、IL-

3诱导骨髓细胞合成胺、IL-6诱导肝细胞合成1-抗糜蛋白酶等。通

过测定所诱生的相应产物，可反映细胞因子的活性。

4．细胞病变抑制法

病毒可造成靶细胞的损伤，干扰素等则可抑制病毒所导致的细胞

病变，因此可利用细胞病变抑制法检测这类因子。

二、免疫学检测法

细胞因子均为蛋白或多肽，具有较强的抗原性。随着重组细胞因

子的消失，可较便利地获得细胞因子的特异性抗血清或单克隆抗体，

因此可利用抗原抗体特异性反应的特性，用免疫学技术定量检测细

胞因子。尽管细胞因子种类繁多，只要获得了针对某一因子的特异

性抗体(包括多克隆抗体或单克隆抗体)均可采纳相像的技术开展工

作。常用的方法包括ELISA、RIA及免疫印迹法。目前，几乎全部常

见细胞因子的检测试剂盒均有商品供应。此外还可利用酶标或荧光

标记的抗细胞因子单克隆抗体，原位检测因子在细胞内的合成及分

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布状况，如近来来进展起