体内药物分析问答题.pdf

SPE：固相萃取(SolidPhaseExtraction，SPE)就是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物

吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附，达到分离和富

集目标化合物的目的。

1、简述体内药物分析的对象及特点

体内药分的对象：人体和动物体液、组织、器官、排泄物

特点：（1）样品量少，不易重新获得

（2）样品复杂，干扰杂质多

（3）供临床用药监护的检测分析方法要求简便、快速、准确，以便迅速为临床提供设计合

理的用药方案及中毒解救措施。

（4）实验室拥有多种仪器设备，可进行多项分析工作。

（5）工作量大，测定数据的处理和阐明有时不太容易。需相关学科参与.

2、简述血浆中游离型药物浓度测定的方法？

平衡透析法、超滤法(UF)、超速离心法和凝胶过滤法

3、常见的生物样品有哪些？简述常用的去除蛋白质的方法？

常见的生物样品有：血液，尿液，唾液，组织，毛发。

去除蛋白质的方法：（1）加入与水相混溶的有机溶剂加入水溶性的有机溶剂；可使蛋白质

的分子内及分子间的氢键发生变化而使蛋白质凝聚，使与蛋白质结合的药物释放出来。常用

的水溶性有机溶剂有：乙腈、甲醇、乙醇、丙醇、丙酮、四氢呋喃等。（2）加入中性盐加入

中性盐，使溶液的离子强度发生变化。中性盐能将与蛋白质水合的水置换出来，从而使蛋白

质脱水而沉淀。常用的中性盐有：饱和硫酸铵、硫酸钠、镁盐、磷酸盐及枸橼酸盐等。

（3）加入强酸当pH低于蛋白质的等电点时，蛋白质以阳离子形式存在。此时加入强酸，

可与蛋白质阳离子形成不溶住盐而沉淀。常用的强酸有：10％三氯醋酸、6％高氯酸、硫酸

-钨酸混合液及5％偏磷酸等。（4）加入含锌盐及铜盐的沉淀剂当pH高于蛋白质的等电点

时，金属阳离子与蛋白质分子中带阴电荷的羧基形成不溶性盐而沉淀。常用的沉淀剂有

CuSO4-NaWO4、ZnSO4-NaOH等（5）酶解法在测定一些酸不稳定及蛋白结合牢的药物时，

常需用酶解法。最常用的酶是蛋白水解酶中的枯草菌溶素。

4，生物样品预处理的目的是什么？应考虑哪些问题？

目的：（1）使药物从缀合物及结合物中释放。（2）纯化与富集样品（3）满足测定方法对分

析样品的要求。（4）保护仪器性能，改善分析条件

主要应考虑下列问题：（1）生物样品的种类（2）被测定药物的结构、理化及药理性质、存

在形式、浓度范围（3）药物测定的目的（4）样品预处理与分析技术的关系

5，用液液萃取发提取生物样品中的药物时，应考虑那些影响因素？

要考虑所选有机溶剂的特性、有机溶剂相和水相的体积及水相的pH值等。

对所选用的有机溶剂，要求对被测组分的溶解度大：沸点低，易于浓集、挥散；与水不相混

溶以及无毒、化学稳定、不易乳化等。最常用的溶剂是乙醚和氯仿等。提取时所用的有机溶

剂要适量。一般有机相与水相（体液样品）容积比为1：1或2：1。根据被测药物的性质及

方法需要，可从实验中考察其用量与测定响应之间的关系，来确定有机溶剂的最佳用量。PH

的影响在溶剂提取中十分重要。水相的pH随药物的理化性质的不同而异，但生物样品一般

多在碱性下提取。这是因为多数药物是亲脂性的碱性物质，而生物样品中的内源性物质多是

酸性的，一般不含脂溶性碱性物质，所以在碱性下用有机溶剂提取时内源性杂质不会被提取

出来。

6，固相萃取法的洗脱方式有哪两种？以亲脂性固相萃取柱为例，简述操作过程。

一种是药物比干扰物质与固定相之间的亲和力更强，因而在用冲洗溶剂洗去干扰物时药物被

保留，然后用一种对药物亲和力更强的溶剂洗脱药物。另一种干扰物质较药物与固定相之间

的亲和力更强，则药物被直接洗脱，干扰物质被保留在萃取柱上。

操作步骤：1吸附柱的选择：据检测量大小、待检物质理化性质。2活化填料：采用甲醇活

化，有利于吸附剂和目标物质相互作用，提高回收率，还能起到除杂作用。3进样：使样品

流经吸附柱进行吸附。4冲洗：用水或者是适当的缓冲溶液对吸附柱进行冲洗，将杂质冲洗

掉。5洗脱：选择适当的洗脱剂进行洗脱，收集洗脱液，然后进行浓缩检验或者是直接在线

检验

7.以色谱法为例，简述色谱条件优化时可进行哪些试验？

（1）试剂与溶剂试验。照拟定的分析方法进行衍生化反应，萃取分离等样品预处理（反应

试剂，衍生化试剂，萃取溶剂等）后，进样分析以考察反应试剂对测定的干扰。通过改变反

应条件、萃取方法或萃取条件，甚至检测器类型。使空白试剂信号不干扰药物的测定（如R

＞1.5）。

本步骤主要考察需经化学反应的预处理过程，若预处理过程仅为生物样品的提取分离，则可

不进行该步骤，直接进行空白生物基质