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免疫磁珠分离技术及常见应用

冯涛201114912食品科学与工程2班

摘要：免疫磁珠分离技术(Immunomagneticbeadsseparationtechniques，IMB)是

生物检测技术的一种具有分离迅速和无需离心等优点。免疫磁珠分离技术以其靶

向特异性强、操作方便、分离高效的优点，迅速渗透到药剂、病理、生理、药理、

微生物、生化及分子遗传学等各个领域，尤其在药物靶向制剂研究方面取得巨大

的进展，在微生物检测、细胞分离、蛋白质组学等方面也多有应用。目前该项技

术在细胞分离、蛋白、免疫学及微生物学检测等方面均取得了较大的进展，是目

前最有推广价值的技术之一

关键词：免疫磁珠；分离；检测；

1.免疫磁珠分离技术

免疫磁珠分离技术(IMB)是将免疫学反应的高度特异性与磁珠特有的磁响

应性相结合的一种新的免疫学技术；是一种特异性强、灵质纯化敏度高的免疫学

检测方法和抗原纯化手段。是近年来国内外研究较多的一种新的免疫学技术〔2〕。

其原理是利用人工合成的内含铁成分，可被磁铁磁力所吸引，外有功能基团，可

结合活性蛋白质(抗体)的磁珠，作为抗体的载体。当磁珠上的抗体与相应的微生

物或特异性抗原物质结合后，则形成抗原-抗体-磁珠免疫复合物，这种复合物具

有较高的磁响应性，在磁铁磁力的作用下定向移动，使复合物与其他物质分离，

而达到分离、浓缩、纯化微生物或特异性抗原物质的目的〔3〕。

1.1免疫磁珠分离技术的分类

免疫磁珠分离技术法按结合的目标物不同有两种方法：（1）阳性分离法，磁

珠结合的物质就是所要分离获得目标物质（2）阴性分离法，磁珠结合不需要的

物质，游离于磁场的细胞为所需物质。一般而言，阴性分离法的磁珠用量比阳性

分离法的大，阳性分离法用的更多。磁性微珠是以金属离子为核心，外层均匀包

裹高分子聚合体的固相颗粒〔4〕。磁性微珠上既可标记针对某种细胞表面抗原的

特异性抗体（直接法）;也可标记非特异抗体(间接法），使分离细胞的范围大大

扩大〔5〕。

2免疫磁珠分离技术的常见应用

2.1应用磁珠技术提取核酸

免疫磁珠技术捕获蛋白质、激素等抗原分子的应用主要体现在定量检测相应

的抗原物质。磁珠捕获具有显著的富集效果，再结合精确高效的检测方法，将得

到极佳的检测效果。磁微粒化学发光免疫分析技术是这类方法的代表，它具有高

灵敏性、高精确性、高稳定性等特点，其检测效果可与放射免疫分析相媲美〔6〕，

目前已广泛应用于各种激素、肿瘤标志物及心肌标志物等检测项目。磁微粒化学

发光免疫分析技术具有荧光灵敏性，且不需要激发光，避免了荧光分析中激发光、

杂散光等背景荧光的影响;同时具有很高的灵敏度，避免了放射免疫分析给操作

者带来的健康隐患以及对环境的污染。此项技术在体外免疫诊断试剂上的应用是

先进的、科学的，拥有众多的优点和特性，是非常理想的检测方法。免疫磁珠技

术在分子水平捕获富集的应用还体现在蛋白质及其它抗原分子的分离纯化，用作

抗原抗体特异性亲和层析可以替代其它纯化介质。

2.2免疫磁珠分离技术在食源性致病菌检测中的应用

2.2.1沙门菌的检测

1984年Mastting卜首次公开发表了用磁性分离技术从食品、粪便中检测沙

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门菌，利用单抗结合到聚苯乙烯磁珠上，捕捉沙门菌，检测限达到10CFU/ml

检测所需时间缩短1天〔7〕。随着抗体技术以及磁珠合成技术的发展，用MS检

测食品中沙门菌已渐渐成熟，并且已得到越来越多的应用。在国外，如Salehi

等用MS和多重PCR结合的方法检测牛腹泻粪便样本中的伤寒沙门菌〔8〕Moreira

等用MS和PCR结合的方法检测生肉中的伤寒沙门菌，检测限为1-10CFU/ml

在国内，许学斌等为检测沙门菌在食品中的污染情况，采集各类食品样品303

份，经增菌后通过特异的MS吸附并接种XLD平板分离沙门菌，结果表明，MS

用于食品中沙门菌的分离效果较好、灵敏、操作简单，能节省分离平板和提高筛

检效率〔9〕。

2.2.2大肠杆菌O157H7的检测

Varshney等利用基于磁性纳米微粒抗体偶联的MS分离牛肉样品中的大肠杆

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菌