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食品中氨基酸总量的测定实验报告
氨基酸含量的测定
氨基酸含量的测定
标准曲线绘制
准确吸取200ug/ml的氨基酸标准溶液0.0,0.6,0.8,1.0,1.2,
1.5,2.0ml,分别置于25ml容量瓶或比色管中,各加水补充至溶
剂为4.0ml,然后加入茚三酮和磷酸缓冲溶液各1ml,混合均匀,
于水浴上加热15min,取出迅速冷至室温,再摇匀,加水至标线
25ml,摇匀。静置15min后,在570nm波长下,以试剂空白为参
比液夨订其余各溶液的吸光度A。以氨基酸的微克数为横坐标,
吸光度A为纵坐标,绘制标准曲线。
样品的测定:将虾研磨冷却过滤后稀释10倍,吸取澄清的样品
溶液
1.5ml,平行三次,按标准曲线制作步骤,在相同条件下测定吸
光度A值,用测得的A值在标准曲线上即可查得氨基酸的微克数。
公式:氨基酸总量(ug/100g)=(c/m*1000)*100*10
式中c是指从标准曲线上查得的氨基酸的ug数;
M是指测定的样品溶液相当于样品的质量g;
PH计酸度计测量ph的方法:
(1)拿下笔帽
(2)按on/off键,机器显示运作
(3)将ph计放入待测液中
(4)轻轻晃动ph计,保证内气泡逸出,使之于溶液充分接触,勿
碰撞杯壁
(5)ph计会立即显示数值,将笔置入待测液待数值稳定,30秒内
将显示正确数值,(特:ph计数值上下浮动或不稳定是正常现象)
(6)按hold键锁定数值,可在待测溶液外记录读取,继续按hold
键解除锁定
(7)按on/off键关闭ph计
(8)轻甩PH计测试笔上多于的水,用蒸馏水或脱离子水冲洗,盖
上笔帽测量温度方法在测试模式下,温度数值与ph数值同步显示
在液晶面板上,但在校准模式下不显示,数值默认为摄氏温度。
(一)挥发性盐基氮(TVB-N)的测定
半微量定氮法
(1)原理:蛋白质在酶和细菌的作用下分解后产生碱性含氮物
质,有氨、伯胺、仲胺等,此类物质具有挥发性,可在碱性溶液
中被蒸馏出来,用标准酸滴定,计算含量。
(2)试剂
①氧化镁混悬液(10g/L)称取1.0g氧化镁,加100ml水,振摇成
混悬液。
②硼酸吸收液(20g/L)
③0.2%甲基红乙醇液
④0.1%亚甲蓝水溶液
临用时将③④等量混合为混合指示液
⑤0.010mol/L盐酸标准溶液或0.0100N硫酸标准溶液
(3)仪器
①半微量定氮装置:Markhan氏式
②微量滴定管:最小分度0.01ml
(4)操作方法
①样液的制备:将样品除去脂肪、骨头及筋腱后,切碎搅匀,
称取10g于锥形瓶中,加100ml水,不时振摇,浸渍30min后过
滤,滤液置于冰箱中备用。
②测定:预先将盛有10ml吸收液并加有5-6滴混合指示液的
锥形瓶
置于冷凝管下端,并使其下端插入锥形瓶内吸收的液面下,精密
吸取5ml上述样品滤液于蒸馏器反应室内,加5ml
1%氧化镁混悬液,迅速盖塞,并加水以防漏气,通入蒸汽,待
蒸汽充满蒸馏器内时即关闭蒸汽出口管,由冷并行管出现第一滴
冷凝水开始计时,蒸馏5min即停止,吸收液用0.0100N
盐酸标准溶液或0.0100mol/L硫酸标准溶液滴定,终点呈蓝紫
色。同时做试剂空白试验。
(5)计算
1?2xN1x141=x100
式中:
X1——样品中挥发性盐基氮的含量,mg/100g
V1——测定用样液消耗盐酸或硫酸标准溶液体积,ml
V2——试剂空白消耗盐酸或硫酸标准溶液体积,ml
N1——盐酸或硫酸标准溶液的摩尔浓度,mol/L
M1——样品质量,g
14——1N盐酸或硫酸标准溶液1ml相当氮的毫克
篇二:牛奶中氨基酸总量的分析测定与比较
摘要目录
Abstract
1.前言1
1.1我国国民当前的营养概况1
1.2牛奶与母乳2
1.3蛋白质3
1.3.1蛋白质的组成特点3
1.3.2在牛奶的生产过程中,蛋白质的变性作用对氨基
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