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穿刺涂片、TCT结合细胞蜡块在病理诊疗中应用;;;;细针穿刺细胞标本采集
经过穿刺吸收或非吸收法,可从充满液体器官或实体性器官中采集细胞标本,如肿瘤、心包膜腔积液、胸膜腔积液、腹膜腔积液和脑脊液等。影像学技术能对小而深、移动且难以触摸病变部位进行定位,有利于穿刺采集标本。;涂片制备
直接涂片是将新鲜标本直接涂在载玻片上。间接涂片是将各种液体标本进行浓缩处理后再涂片。涂片制备方法见图8-1,图8-2。
渗出液、灌洗液和尿液等标本不易黏附在载玻片上,宜采取蛋白类(如牛血清清蛋白)或离子类(如多聚赖氨酸)黏附剂,增强细胞和载玻片之间黏附力,最大程度保留标本中细胞。;三、标本固定
1.湿固定是经过使细胞胞质脱水、蛋白质凝固而到达固定目标。
惯用固定液为乙醇类液体,惯用方法有浸润法和包被法。
湿固定可引发细胞皱缩,Carnoy固定液(乙醇-氯仿-冰乙酸固定液)能溶解红细胞,适合用于处理显著血性标本。聚乙二醇固定液能在涂片表面形成一层保护性蜡质膜,适合用于标本长途转运和大规模人群筛检。;2.空气干燥固定是经过空气蒸发方法到达固定目标。最好是逆着气流方向尽快将涂片干燥。与湿固定相比,空气干燥固定有使细胞增大趋势(图8-3)。;四、标本浓缩技术
(一)传统技术
1.离心法和细胞离心法①离心法:适合用于大量液体标本。②细胞离心法:适合用于少许液体、中等量细胞标本。
2.滤膜过滤法滤膜过滤法适合用于大量液体、少许细胞标本。
3.细胞块法适合用于大多数悬液标本。制备方法有血浆凝血酶法和琼脂法等。;(二)液基细胞学技术
液基细胞学(LBC)技术是一个半自动或全自动标本处理技术,其优点是:
①涂片上细胞分布均匀、分布范围小、背景清楚。
②筛检简便、快速。
③能提升诊疗灵敏度和特异度。
④能显著降低标本不满意率。
⑤可用于原位杂交和免疫细胞化学染色。;LBC技术是对传统技术有效补充,但对一些非妇科标本,因LBC涂片缺??背景成份,会影响细胞学诊疗。当前,惯用LBC技术有ThinPrep法和SurePathPrep法。LBC技术与传统技术比较见表8-3。;穿刺涂片TCT结合细胞蜡块在病理诊疗中的应用专家讲座;五、染色方法
Papanicolaou染色法适合用于湿固定涂片。
Romanowsky染色法适合用于空气干燥固定涂片,在非妇科标本染色中惯用。
苏木素和伊红染色法是组织切片最惯用染色方法,也是许多细胞病理学试验室惯用染色方法。
不一样染色技术均适合用于妇科或非妇科标本永久性染色。;六、细胞病理学诊疗
细胞病理学诊疗是一个复杂过程,但不能过分强调最终止论主要性。因为细胞学检验影响原因很多(表8-4),当涂片上有大量保留良好细胞时,会提升诊疗准确性,而缺乏背景资料、涂片不佳、染色含糊等则会造成误诊。;穿刺涂片TCT结合细胞蜡块在病理诊疗中的应用专家讲座;(一)细胞形态学判断基本标准
1.细胞数量和类型细胞数量和类型提供了靶组织或器官主要信息,足够量标本是提升结果可靠性主要原因。
2.结构特征在细胞学涂片中经常缺乏结构特征。正常上皮细胞常保持细胞极性和细胞间黏附性经典恶性上皮细胞极性差,细胞间相互重合,有时三维状聚集呈圆形。分化差癌细胞黏附性更差,多散在分布。;3.细胞核特征细胞核特征是判断良性与恶性细胞关键。正常细胞核体积相对较小,呈圆形或卵圆形,边界光滑,染色质呈细颗粒状。
涂片上同一类型细胞之间差异很小,称为单形性。细胞核改变与特征见表8-5。;穿刺涂片TCT结合细胞蜡块在病理诊疗中的应用专家讲座;4.细胞质特征细胞质由Golgi体、核糖体、内质网、线粒体和代谢物等组成,是影响细胞染色性主要原因之一。
正常细胞或分化好肿瘤细胞常见黏液球、泡沫状微空泡、微绒毛刷状缘和纤毛。邻近细胞会出现细胞质铸模现象。少数细胞有吞噬现象,见于良性或恶性疾病,后者更常见。
细胞质变性包含水肿性和空泡样改变等,质膜完整性丧失使细胞内容物溢出,即细胞溶解。;;;;;;
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