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番木瓜环斑病毒的研究进展 冯黎霞.doc

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番木瓜环斑病毒的研究进展

冯黎霞李华平周国辉

(华南农业大学资环学院植物病毒实验室)

摘要:番木瓜环斑病毒病是世界上番木瓜生产最重要的病毒病害之一。本文将从番木瓜环斑病毒的生物理化特性分子生物学防治研究等方面进行综述。尤其是对近几年的防治研究进展做了较为详尽的综述。

关键词:番木瓜环斑病毒生物学和理化特性分子生物学防治研究

番木瓜(Caricapapaya,pawpaw)原产中南美洲地区,广泛分布于美洲亚洲和大洋州的热带亚热带地区,具有较高的食用加工医药观赏等价值。属多年生长绿草本果树。然而,许多病毒病成为番木瓜生产发展的主要限制因素。这些病毒病主要包括番木瓜环斑病毒(papayaringspotvirusPRSV)番木瓜花叶病毒(PMV)番木瓜顶端坏死病毒(PANV)番木瓜凋萎病毒(PDNV)等。在我国华南地区,番木瓜环斑病毒是番木瓜病毒病的最主要病原。共有4个株系和一个分离物,YsSmVbLc株系以及Ys和Vb混合侵染的分离物,其中Ys为华南地区的优势株系,Sm为强毒株系,Lc不常见(蔡建和等,1994)。

PRSV严重影响了番木瓜的优质高产,使番木瓜由多年生果树变为一年生果树,丧失了常年产果的习性。随着对PRSV的研究深入病害认识的不断加深,以基因工程为手段的抗病毒工程也在多个国家和地区开展。肖火根(1995)对PRSV曾经有过一篇综述。本文就PRSV的这几年来新的研究进展进行综述。

1生物学和理化特性

11寄主范围和分类

PRSV的寄主范围比较窄,吴方城等在接种的15个科,50种植物中,只有番木瓜科和葫芦科的若干种为PRSV所侵染,并产生系统症状。根据寄主范围可划分为P型和W型两大类。P型株系是番木瓜生产的重要病原,寄主主要为葫芦科藜科番木瓜科;W型(即西瓜花叶病毒一号)是葫芦科作物的主要病原,虽然和P类型的株系或分离物血清学反应密切相关,但是不侵染番木瓜。随着W型株系在世界范围内危害的加重。W型株系的研究在近几年来也越来越被重视。

PRSV—P类型的株系或分离物,国内外迄今已报道的约有36个,我国华南地区有一个分离物和5个株系,分别根据在寄主西葫芦上的症状反应命名为YsVbLcSmMl。通过对PRSV株系的生物学血清学和分子生物学研究,表明广东省番木瓜的病毒毒源种类只有PRSV。(蔡建和等,1994;贺国安等,2001)

12株系和症状反应

在番木瓜上YsVbLcSm株系的田间症状反应基本相同,主要为花叶斑驳叶畸形和(或)卷曲茎干上水渍状斑点和(或)条斑果上水渍状斑点或(和)环状斑等。在西葫芦上症状有所不同,接种后Ys叶上有黄色斑点;Vb沿叶脉产生灰白色带;Sm重花叶;Lc叶片卷曲(蔡建和等,1994)。肖火根等(1994)通过研究发现Sm株系容易侵染昆若藜和苋色藜,并产生局部枯斑,其余3个株系不容易侵染。4株系的血清学密切相关,其外壳蛋白氨基酸序列同源率高,Ys和Sm为944%,Ys与Sm为969%。它们在寄主植物上症状反应和潜育期,在西葫芦上的增殖和运转速度,以及它们的外壳蛋白的氨基酸组成等方面有一定差异。在西葫芦植株体内,Sm株系病毒增殖最快,浓度最高,运转也最快,依此为VbYs。又根据症状反应,致病力最强的为Sm,依此为YsVb。

贺国安等(2001)采用RT-PCR方法合成了本研究室保存的番木瓜畸叶病毒(PMALV)的外壳蛋白(CP)基因,将其CP基因克隆,并进行了序列分析。结果表明,PMALV基因核苷酸序列全长为861nt,推导其编码287个氨基酸。与番木瓜环斑病毒(PRSV)美国夏威夷HA株系和澳大利亚W株系的CP基因相比,在第66nt处开始连续缺失3个核苷酸。与PRSV的华南YsSm和G株系以及夏威夷的HA和澳大利亚的W株系相比,其CP基因序列同源率为90%左右,其推导的氨基酸序列同源率达95%以上。此结果表明,PMALV属于PRSV的一个株系。称其为番木瓜环斑病毒畸叶株系(ML株系)。

2PRSV的分子生物学

21基因组结构

PRSV属于马铃薯Y病毒属(Potyvirus),粒体大小约为(500-800nm×12nm),为线状,病组织超薄切片电镜观察发现4个株系均为典型的风轮状内含体。属于单链RNA病毒(+ssRNA)PRSV夏威夷株系HA-RNA基因组的全部核苷酸序列共有10326个核苷酸(不包括3′端的PolyA尾巴)PRSV—HA-RNA的碱基组成为A312%U270%G230%C180%和其它Potyviruses相似,5′端含85核苷酸,3′端非编码区含209个核苷酸,3′端为保守序列,只有一个阅读框架(OpenReadingFrame),其阅读的起始点在10118—10120核苷酸处,此阅读框架可编码一个由334

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