Smoc2在血管钙化中的作用及机制研究.docx

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第一部分Smoc2在血管钙化中的作用及机制研究

TOC\o1-3\h\u19182摘要 I

21358Abstract II

11187前言 III

10570实验部分 1

190091材料与试剂 1

213351.1材料 1

21971.2仪器及试剂 1

312411.3实验方法 5

107721.3.1小鼠基因型鉴定 5

94511.3.2细胞复苏 6

28011.3.3细胞传代培养 6

120151.3.4细胞冻存 7

296211.3.5慢病毒包装 8

149321.3.6慢病毒感染 8

292061.3.7培养单克隆细胞 9

22081.3.8高磷诱导血管平滑肌细胞钙化 9

106281.3.9培养细胞茜素红染色 9

326381.3.10裂解法提取蛋白质 9

248481.3.11TRIzol法提取蛋自和RNA 10

4121.3.12BCA法(BicinchoninicAcid)法蛋自定量 10

148891.3.13WesternBlot 11

36982实验结果 13

57522.1SMOC2在主动脉中表达 13

132382.2高磷酸盐诱导MOVAS成骨分化后Smoc2表达降低 14

123492.3Smoc2基因敲除小鼠鉴定 15

85312.4Smoc2基因敲除促进小鼠主动脉钙化 15

122272.4.1Smoc2基因敲除加重VD诱导小鼠主动脉钙化 15

241392.4.2VD诱导Smoc2--小鼠的组织钙含量和ALP活性增加 19

21412.4.3VD诱导促使Smoc2--小鼠主动脉平滑肌问成骨细胞分化 20

244712.5敲低Smoc2促进高磷酸盐诱导的血管平滑肌细胞钙化 21

138992.6SMOC2过表达抑制高磷酸盐诱导的血管平滑肌细胞化 24

181692.7Smoc2通过PMAPK信号通路参与血管化讨论 25

63343讨论 30

44644结论 31

12553参考文献 32

31272致谢 33

第二部分综述

15907引言 34

181061概述 34

35652SMOC2在血管钙化的调节情况 35

260163小结 36

9744参考文献 37

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第一部分Smoc2在血管钙化中的作用及机制研究

摘要

目的:血管钙化是多种心血管疾病共有的病理过程,与高血压、冠心病等紧密相关。尽管目前缺乏早期诊断和有效治疗手段,但研究其分子机制对于预防和治疗具有重要意义。方法:利用基因编辑技术构建了Smoc2基因敲除小鼠模型,通过高剂量维生素D诱导血管钙化,对比野生型和敲除型小鼠的差异。结果:在体外实验中,我们观察到高磷酸盐环境对平滑肌细胞的SMOC2表达产生了显著的下调效应,这一变化与细胞钙化过程的加速密切相关。进一步的RNA测序分析结果表明,CAMP和MAPK信号通路在调控血管钙化进程中扮演着至关重要的角色。通过对比正常磷酸盐水平与高磷酸盐条件下的细胞反应,我们能够更深入地理解这些信号通路如何影响血管健康,并为未来的治疗策略提供潜在的靶点。结论:Smoc2的缺失加剧了血管钙化,为深入理解其分子机制和开发治疗策略提供了新见解。

关键词:血管钙化;SMOC2;血管平滑肌细胞;高磷酸盐诱导

TheroleandmechanismofSmoc2invascularcalcification

Abstract

Objective:Vascularcalcificationisacommonpathologicalprocessofvariouscardiovasculardiseases,whichiscloselyrelatedtohypertensionandcoronaryheartdisease.Althoughthereisalackofearlydiagnosisandeffectivetreatment,thestudyofitsmolecularmechanismisofgreatsignificanceforpreventionandtreatment.Methods:Smoc2geneknockoutmousemodelwasconstru

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