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目录
第一部分Smoc2在血管钙化中的作用及机制研究
TOC\o1-3\h\u19182摘要 I
21358Abstract II
11187前言 III
10570实验部分 1
190091材料与试剂 1
213351.1材料 1
21971.2仪器及试剂 1
312411.3实验方法 5
107721.3.1小鼠基因型鉴定 5
94511.3.2细胞复苏 6
28011.3.3细胞传代培养 6
120151.3.4细胞冻存 7
296211.3.5慢病毒包装 8
149321.3.6慢病毒感染 8
292061.3.7培养单克隆细胞 9
22081.3.8高磷诱导血管平滑肌细胞钙化 9
106281.3.9培养细胞茜素红染色 9
326381.3.10裂解法提取蛋白质 9
248481.3.11TRIzol法提取蛋自和RNA 10
4121.3.12BCA法(BicinchoninicAcid)法蛋自定量 10
148891.3.13WesternBlot 11
36982实验结果 13
57522.1SMOC2在主动脉中表达 13
132382.2高磷酸盐诱导MOVAS成骨分化后Smoc2表达降低 14
123492.3Smoc2基因敲除小鼠鉴定 15
85312.4Smoc2基因敲除促进小鼠主动脉钙化 15
122272.4.1Smoc2基因敲除加重VD诱导小鼠主动脉钙化 15
241392.4.2VD诱导Smoc2--小鼠的组织钙含量和ALP活性增加 19
21412.4.3VD诱导促使Smoc2--小鼠主动脉平滑肌问成骨细胞分化 20
244712.5敲低Smoc2促进高磷酸盐诱导的血管平滑肌细胞钙化 21
138992.6SMOC2过表达抑制高磷酸盐诱导的血管平滑肌细胞化 24
181692.7Smoc2通过PMAPK信号通路参与血管化讨论 25
63343讨论 30
44644结论 31
12553参考文献 32
31272致谢 33
第二部分综述
15907引言 34
181061概述 34
35652SMOC2在血管钙化的调节情况 35
260163小结 36
9744参考文献 37
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第一部分Smoc2在血管钙化中的作用及机制研究
摘要
目的:血管钙化是多种心血管疾病共有的病理过程,与高血压、冠心病等紧密相关。尽管目前缺乏早期诊断和有效治疗手段,但研究其分子机制对于预防和治疗具有重要意义。方法:利用基因编辑技术构建了Smoc2基因敲除小鼠模型,通过高剂量维生素D诱导血管钙化,对比野生型和敲除型小鼠的差异。结果:在体外实验中,我们观察到高磷酸盐环境对平滑肌细胞的SMOC2表达产生了显著的下调效应,这一变化与细胞钙化过程的加速密切相关。进一步的RNA测序分析结果表明,CAMP和MAPK信号通路在调控血管钙化进程中扮演着至关重要的角色。通过对比正常磷酸盐水平与高磷酸盐条件下的细胞反应,我们能够更深入地理解这些信号通路如何影响血管健康,并为未来的治疗策略提供潜在的靶点。结论:Smoc2的缺失加剧了血管钙化,为深入理解其分子机制和开发治疗策略提供了新见解。
关键词:血管钙化;SMOC2;血管平滑肌细胞;高磷酸盐诱导
TheroleandmechanismofSmoc2invascularcalcification
Abstract
Objective:Vascularcalcificationisacommonpathologicalprocessofvariouscardiovasculardiseases,whichiscloselyrelatedtohypertensionandcoronaryheartdisease.Althoughthereisalackofearlydiagnosisandeffectivetreatment,thestudyofitsmolecularmechanismisofgreatsignificanceforpreventionandtreatment.Methods:Smoc2geneknockoutmousemodelwasconstru
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