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第五节正文格式及撰写;一、正文格式;(一)基本结构;(二)层次编号;详细示例;相关标题注意事项;相关标题注意事项;例6肺癌端粒酶活性、p53突变蛋白及
细胞增殖DNA合成期百分比相关研究;二、正文撰写;(一)引言;1撰写要求;2注意事项;2注意事项;2注意事项;例:成年大鼠嘴侧迁移流内磷酸酪氨酸阳性细胞;2注意事项;2注意事项;(二)材料(资料)和方法;1、写作要求;(1)真实性;(2)科学性;(3)可重复性;2详细内容;(1)研究对象;C标本起源于人体或动物标本应交代其起源和搜集方法,以利于评价样本可靠性。
D入选标准全部试验对象都必须有入选标准,这一点对临床试验尤为主要。如志愿者筛选、病例诊疗标准、标本质量要求等。
E试剂、药品和仪器全部上述物品应有生产或制造者,试剂应有纯度和配制方法(试剂合),药品应有剂型、剂量、给药方式,仪器应有型号、生产厂。;(2)分组;(3)试验(或试验)方法;(4)观察指标;(5)数据处理及统计学方法;总之,材料(资料)和方法一节撰写应到达:主题清楚,线索明确,表示准确,合乎规范,强调可重复性,突出真实性。
另外,写作时,可考虑结果写作方式,将材料(资料)和方法一节架构和结果一节架构相对应,增强文章可读性和逻辑表示能力。教材对材料(资料)和方法一节撰写进行了深入讨论,并提出了6点值得注意问题,请加以重视!;例:降钙素基因相关肽对大鼠全脑缺血再灌注后
海马CA1区AP-1DNA结合活性影响;1.2试验动物与分组选取正常健康雄性SD大鼠64只,体重250~300g,由徐州医学院试验动物中心提供。试验动物随机分为四组:假手术组(Sham组)、全脑缺血/再灌注组(I/R组)、生理盐水组(NS组)和CGRP组(再分为C2.0组,C4.0组)。每组动物又分为二个亚组(n=4),其中一组动物标本用于AP-1DNA结合活力测定,另一组用于组织学观察。采取颈动脉负压分流法[3]制备大鼠全脑缺血再灌注模型。
1.2.1全脑缺血/再灌注组(I/R组)试验大鼠以水合氯醛腹腔麻醉(350mg/kg体重),取颈部正中切口,分离左右颈总动脉及右颈外动??;另取左侧腹股沟部切口,分离左股静脉并置管与注射器相连,从左股静脉注入肝素(180u)后迟缓注入生理盐水;用微动脉夹夹闭两侧颈总动脉,从右颈外动脉向近心端插入套管针至颈内动脉与颈外动脉分叉处,取出针芯,套管接三通与注射器相连,连续抽吸颈总动脉内血液,此为脑缺血开始,抽血速度平均为;0.3ml/min左右,在抽血同时,间断更换注射器,将抽出血液从左股静脉连续回输,速度与抽血速度相等。连续抽血(全脑缺血)15min后停顿抽吸血液,拔出套管并结扎颈外动脉,去除两侧颈总动脉上微动脉夹,此为再灌注开始。拔出股静脉中套管并结扎股静脉,缝合颈部及腹股沟部切口。在大鼠缺血以及缺血复灌后直到恢复自主活动期间,调整加热用白炽灯使肛温稳定维持在36.5-37.5度之间。
1.2.2CGRP组(分为C2.0组,C4.0组)全脑缺血过程同上,于再灌注开始时经右颈外动脉中套管向颈动脉内注入CGRP(2.0μg/kg或4.0μg/kg,1mg/L,注射时间为30min),然后拔出套管并结扎右颈外动脉,其余步骤同上。
1.2.3生理盐水组(NS组)于再灌注开始时经右颈外动脉中套管向颈动脉内注入等量生理盐水,其余步骤同给药组。
1.2.4假手术组(Sham组)麻醉和手术步骤同全脑缺血再灌注组,只是不夹闭左右颈总动脉,不回抽血液,不注射药品。;1.3EMSA方法测定AP-1DNA结合活性
1.3.1细胞核抽提物制备依据文件报道[4],略作修改。在缺血再灌3h将大鼠快速断头处死,分离海马,沿海马裂分成两部分,其中背侧部分切除海马伞后即为CA1区。将所得标本加入冰凉匀浆缓冲液进行匀浆,然后以7000×g离心30s,再加入匀浆缓冲液悬起沉淀,……
1.3.2AP-1DNA结合序列标识、纯化在T4激酶作用下,将γ-32P-ATP标识于AP-1DNA结合序列上,经乙醇沉淀法纯化。
1.3.3EMSA依据试剂盒说明进行。将适量核蛋白抽提物与标识DNA结合序列结合。反应产物经4%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳完成后,-70度冰箱内放射性自显影,用凝胶分析系统进行密度扫描,以D值表示转录因子与标识探针结合活性。;1.4组织学观察另取4组动物作普通形态染色观察,依前述方法分假手术组(Sham组)、全脑缺血/再灌注组(I/R)、生理盐水组(NS组)和CGRP组
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