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现代分子生物学习题与答案
一、填空题
1.基因工程是70年代发展起来的遗传学的一个分支学科.
2.基因工程的两个基本特点是:1分子水平上的操
作,2细胞水平上的表达
3.基因克隆中三个基本要点是:克隆基因的类型;受体的
选择;载体的选择
4.通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定
基因区域所得到的不同大小的片段,可以构建显示该区域各
限制性内切核酸酶切点相互位置的限制性酶切图谱.
5.限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的,
第一个大写字母取自属名的第一个字母,第二、三两个字母取
自_种名的前两个字母,第四个字母则用株名表示.
6.部分酶切可采取的措施有:1减少酶量;2缩短反应
时间;3增大反应体积等.
7.第一个分离的限制性内切核酸酶是EcoK;而第一个用于
构建重组体的限制性内切核酸酶是_EcoRl.
8.限制性内切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同,但识别的
序列都是GGCC,它们属于异源同工酶.
9.DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_枯草杆菌蛋白酶切
割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段,具有两种
酶活性:15-3合成酶的活性;23-5外切核酸酶的活
性.
10.为了防止DNA的自身环化,可用碱性磷酸酶去双链
DNA_5’端的磷酸基团.
11.EGTA是_Ca2+_离子螯合剂.
12.测序酶是修饰了的T7DNA聚合酶,它只有_5-3合成酶
的活性,而没有3-5外切酶的活性.
13.切口移位nicktranslation法标记DNA的基本原理在于
利用DNA聚合酶I的__5一3外切核酸酶和5一3合成酶的
作用.
14.欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平
末端的双链形式,通常可采用____S1核酸酶切割或DNA聚合
1/30
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酶补平.
15.反转录酶除了催化DNA的合成外,还具有__核酸水解酶
H的作用,可以将DNA-
RNA杂种双链中的_RNA_水解掉.
16.基因工程中有3种主要类型的载体:质粒DNA,病毒DNA,
质粒和病毒DNA杂合体.
17.就克隆一个基因DNA片段来说,最简单的质粒载体也
必需包括三个部分:__复制区:含有复制起点;选择标记:
主要是抗性基因;克隆位点:便于外源DNA的插入.另外,
一个理想的质粒载体必须具有低分子量.
18.一个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养一段时间
后,一部分细胞中已测
不出质粒,这种现象叫质粒消除或治愈.
19.pBR322是一种改造型的质粒,它的复制子来源于pMBl,
它的四环素抗性基因来自于pSCl01,它的氨苄青霉素抗性基
因来自于pSF2124R质粒.
20.YAC的最大容载能力是1000kb,BAC载体的最大容载能
力是300kb.
21.pSCl01是一种严紧复制的质粒.
22.pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体.pUC系列的载体
是通过pBR322和M13
两种质粒改造而来.它的复制子来自pMBl,Amp
抗性基因则是来自转座子.
23.噬菌体之所以被选为基因工程载体,主要有两方面的原
因:一是它在细菌中能够大量繁殖,这样有利于外源DNA的
扩增;二是对某些噬菌体如噬菌的遗传结构和功能研究
得比较清楚,其大肠杆菌宿主系统的遗传也研究得比较详尽.
24.野生型的M13不适合用作基因工程载体,主要原因是没
有合适的限制性内切核酸酶识别位点和选择标记.
25.黏粒cos
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