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第二节多肽与蛋白质类药品
?一、多肽与蛋白质类药品概述
多肽和蛋白质是生物体广泛存在主要生化物质。含有各种多样生理生化功效,也是一类主要生物药品。
(一)多肽类药品
活性多肽是生化药品中非常活跃一个领域。动物体内已知活性多肽主要是从内分泌腺、组织器官、分泌细胞和体液中产生取得。从植物中发觉和研究新活性多肽也引发了人们广泛注意。;许多活性蛋白质、多肽都是由无活性蛋白质前体,经过酶加工剪切转化而来。
从寻找新药角度看,研究活性多肽结构与功效关系,有利于了解多肽中哪些氨基酸序列是活性所必需,方便以更短多肽来代替。
用不一样氨基酸去置换活性多肽中相关氨基酸,能够提升其生理活性,降低临床不良反应。
同时,对氨基酸排列形式——立体结构研究,有利于设计新活性多肽类药品。;当前,主要多肽类药品有以下几个:
1、多肽激素
(1)垂体多肽激素
(2)下丘脑激素
(3)甲状腺激素
(4)胰岛激素
(5)胃肠道激素
(6)胸腺激素;2、多肽类细胞生长调整因子
表皮生长因子(EGF)、转移因子(TF)、心钠素(ANP)等。
3、含有多肽成份其它生化药品
(二)蛋白类药品
蛋白质生化药品除了蛋白质类激素和细胞生长调整因子外,还有像血浆蛋白质类、黏蛋白、胶原蛋白及蛋白酶抑制剂等大量其它生化药品品种。
作用方式也从生化药品对机体各系统和细胞生长调整扩展到被动免疫、替换疗法、抗凝血剂以及蛋白酶抑制剂等各种领域。
;自20世纪70年代后期开始,人们首先把目标集中在应用基因工程技术制造主要蛋白质药品上。
现正从微生物和动物细胞表示向转基因动植物发展。
鉴于一些蛋白质和多肽生化药品有一定抗原性、轻易失活、在体内半衰期短、用药路径受限等难以克服缺点。
对一些蛋白质类生化药品进行结构修饰、应用计算机图像技术研究蛋白质与受体及药品相互作用、发展蛋白质工程及设计相对简单小分子来代替一些大分子蛋白质类药品而且起到增强或增加选择性疗效作用等。;主要蛋白质类药品有以下几个:
1、蛋白质激素
(1)垂体??白质激素。
(2)促性腺激素。
(3)胰岛素及其它蛋白质激素胰岛素、胰抗脂肝素、松弛素、尿抑胃素。
2、血浆蛋白质
3、蛋白质类细胞生长调整因子
4、黏蛋白
5、胶原蛋白;6、碱性蛋白质
硫酸鱼精蛋白等。
7、蛋白酶抑制剂
胰蛋白酶抑制剂、大豆胰蛋白酶抑制剂等。
8、植物凝集素
二、多肽与蛋白质类药品制造方法
当前用于多肽和蛋白质类药品制造方法主要有三种:提取分离纯化法、化学合成法和基因工程法。这里重点介绍提取分离纯化法。
(一)蛋白质与多肽类药品提取、分离纯化;1、材料选择
采取提取分离纯化法取得多肽及蛋白质类药品,其原料主要起源有动植物组织和微生物等,标准是要选择富含所需蛋白质多肽成份、易于取得和易于提取无害生物材料。
对天然蛋白质类药品,为提升质量、产量和降低生产成本,对原料种属、发育阶段、生物状态、起源、解剖部位、生物技术产品宿主菌或细胞都有一定要求,了解这些,可使分离纯化工作事半功倍。
;(1)种属牛胰含胰岛素单位比猪胰高。
抗原性则猪胰岛素比牛胰岛素低,前者与人胰岛素相比,只有1个氨基酸差异,而牛有3个氨基酸差异。
因为种属特异性关系,用猪垂体制造生长素对人体无效,不能用于人体。
由动物细胞产生干扰素与人干扰素抗原有交叉反应,而对一些非同源性动物一些细胞抗病毒活性作用并不下降。;(2)发育生长阶段幼年动物胸腺比较发达,老龄后逐步萎缩,所以胸腺原料必须采取幼龄动物。
HCG在妊娠妇女60~70d尿中到达高峰,到妊娠18周已降到最低水平。然而HMG必须从绝经期妇女尿中获取。
肝细胞生长因子是从肝细胞分化最旺盛阶段胎猪或胎牛肝中取得,若用成年动物,必须经过肝脏部分切除手术后,才能取得富含肝细胞生长因子原料。
(3)生物状态动物饱食后宰杀,胰脏中胰岛素含量增加,对提取胰岛素有利,但胆囊收缩素分泌使胆汁排空,对胆汁搜集不利。;(4)原料起源血管舒缓素可分别从猪胰脏和猪颚下腺中提取,二者生物学功效并无二致,而稳定性以颚下腺起源为好,因其不含蛋白水解酶。
(5)原料解剖学部位猪胰脏中,胰尾部分含激素较多,而胰头部分含消化酶较多,如分别摘取则可提升各产品收率:
胃膜素以采取全胃黏膜为好,胃蛋白酶则以采取胃底部黏膜为好,因胃底部黏膜富含消化腺。
;2、提取
提取总要求是最大程度地把有效成份提取出来,关键是溶剂选择。
提取所用溶剂选择标准,首先对被制备物含有最大溶解度,并
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