化学发光免疫技术-精品课件课件1.pptx

免疫学检验技术

化学发光剂

职业教育医学检验技术专业教

■—■—

-—―

化学发光剂

发光概念

发光：分子或原子中的电子吸收能量后，由低能级的基态跃迁到高能级的激发态，然后再返回到基态，糅放的能量表现为光的发射。

灞发态

动画：发光

燹光

\

s态

化学发光剂

发光类型

(1)光照发光

如荧光免疫技术

(2)生物发光

如萤火虫发光

(3)化学发光（闪脚光)

化学发光剂

化学发光剂概念/类型

化学发光剂：在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物称为化学发光剂或发光底物。

类型：⑴直接化学发光剂

(2)酶促反应的发光底物

r3)电化学发細

化学发光剂

接化学发光剂

发光剂：吖啶酯（AE)

H2O2

反应: AE 470nm{光

0H

反应条件：H202、NaOH

特点：闪光型，Is之内芫成（仪器记录Is之内产生的光子能)

^ss

化学发光剂

直接化学发光剂绘图

s t

1)吖陡醋（AE)

)AE标记抗原

)AE标记抗体

@

o

■T

.

.

1

化学发光剂

酶促反应的发光底物

标记酶：辣根过氧化物酶(HRP).碱』住鱗酸酶（ALP

发光底物1:鲁米诺或其衍生物

H2O2

425nm(发光懵）

0H

鲁米诺

K^CVOH

425nm(发光快）

反应条件：H202%

HRP

NaOH, HRP

化学发光剂

酶促反应的发光底物

E

丄

发光底物2:金刚垸（AMPPD)

470nm(光）

ALP

反应iAMPPD

反应条件：ALP

1)酶标抗原

2)酶标抗体

祗学发光剂

m

厂!

o

电化学发光剂

发光剂：三联吡啶钌【Ru(bpy)3】

条件：

1)电子供体：三丙胺（TPA)

2)电扱：P日极（+ )

特点：三联吡啶钌可持续发光

1)三联吡啶钌标记的抗原

2)三联吡啶t7标记的抗体

■-

化学发光剂

■_

兹

电化学发光剂

:化学发光剂

I

化学发光剂

提问

化学发光酶免疫分折的英文缩写是CLEIA,那化学发光免疫分折和电化学发光免疫分析的英文缩写是什么呢？此三种化学发光免疫分析的发光剂或发光底物是下列选顷中的哪一种呢？

免疫学检验技术

. m

化学发光免疫技术类型

职业教育医学检盤

化学发光免疫技术类型

化学发光免疫技术类型

(1)化学发光免疫分析

(2)化学发光酶免疫分析

(3)电化学发光免疫分析

免疫学检验技术

化学发光免疫分析

职业教育医#

^

化学发光免疫分析

化学发光免疫分析(CUA) (以双抗体夹心法检测微量抗原为例)

标本：血清（待测微量抗原）

试剂：磁珠包被的已知抗体；AE标记抗体

:化学发光免疫分析的基本过程

化学发光免疫分析

化学发光免疫分析(CUA) (以双抗体夹心法检测微量抗原为例)

过程：1加血清、磁珠包被的已知抗体

和AE标记抗体，反应：

2)洗涤；

)加叱02和NaOH,AE发光：

)集光器和光电倍增管接收、记录，光信号转为电信号,

计算机处理，对抗原进行定量o

自学视频：化学发光免疫分析仪

::•sss

免疫学检验技术

化学发光酶免疫分析

m•

^

化学发光酶免疫分析

■■■_——■■■.■

化学发光酶免疫分析（CLEIA) (以双抗体夹心法检测微量抗原为例)

标记酶：HRP

标本：血清（待测微量抗原)

化学发光酶免疫分析

化学发光酶免疫分析（CLEIA) (以双抗体夹心法检测微量抗原为例)

思路：HRP标记抗体在鲁米诺、H202和NaOH存在的条件下

发光（光的强度与待测抗原成正比）集光器和光电倍增管接

收、记录（光信号转为电信号）

——

计算机处理可走量抗原

自学视频：化学发光酶免疫分析（半自动)

化学发光酶免疫分析

化学发光酶免疫分析（CLEIA) (以双抗体夹心法检测微量抗原为例)

标记酶：ALP

标本：血清（待测微量抗原)

试剂：磁珠包被的已知抗体；

化学发光酶免疫分析

化学发光酶免疫分析（CLEIA) (以双抗体夹心法检测微量抗原为例)

思路：ALP标记抗体在AMPPD存在的条件下发光（光的强度与

待测抗原成正比）

集光器和光电倍增管接收、记录（光信号转

——

为电信号） 计算机处理可定量抗原

免疫学检验技术

职爐育医学检

-

电化学发光免疫分析

激

电化学发光免疫分析（ECLIA) (以双抗体夹心法检测微量抗原为例)

标本：血清（待测微量抗原)

试剂：磁珠包被的已知抗体;

【Ru(bpy)J

2+标记抗体

TP