常用培养基的配置课件.pptVIP

常用培养基的配制泰兴市人民医院检验科微生物室刘鸿丽

培养基的种类1.按物质组成①天然培养基②半合成培养基③合成培养基2.按物理性状①液体培养基②半固体培养基（0.2%---0.5%琼脂）③固体培养基（1.5%~2.0%琼脂）

培养基的种类?按用途基础培养基营养培养基鉴别培养基选择培养基厌氧培养基

1.培养基的制备1.调制与溶解2.调节pH3.过滤澄清4.分装5.灭菌6.质量检查7.保存

培养基制培养基的调配与溶解调配：先在三角烧瓶中加入少量蒸馏水，按培养基的配方准确称取各成分，混悬于蒸馏水中，然后用剩余的水冲洗瓶壁。溶解：将各成分混匀于水中，加热至各成分均溶解溶解过程中应随时搅拌。

培养基的制培养基的PH调节培养基PH是细菌生长繁殖的重要条件。由于不同细菌对PH的要求不同，所以不同培养基所需PH不同。一般培养基PH为7.2～7.6，也有酸性或碱性培养基。培养基经高压灭菌后，PH降低0.1～0.2，调PH时应高于所需PH0.1～0.2。具体方法有PH试纸法、电子PH计法和比色法等。

培养基的制培养基的分装与灭菌分装：根据需要将培养基分装于事先洗净的适宜容器中。其分装量最多不超过容积的二分之一。培养基分装后，用清洁的塞子塞好，并用纸包扎后灭菌。有些培养基需高压后再进行分装，此时必须采用无菌操作方法，用前应作无菌检查。灭菌：高压蒸汽法灭菌是目前最可靠的方法。培养基的灭菌温度和时间，随培养基的品种、装量和容器的大小而定。

培养基的制培养基的定?一般性状颜色、透明度、PH等。?无菌?效能使用标准菌株，观察其生长繁殖和生化反应情况。

一、麦康凯琼脂【用途】用于分离革兰氏阴性杆菌【配制方法】称取购买的梅里埃公司的麦康凯琼脂粉g溶解于400ml蒸馏水中，经高压灭菌后（121℃15分钟）冷却至50℃，倾倒平板，冷却后，放冰箱保存。【质量控制】选择性生长：大肠埃希菌ATCC25922生长红色混浊菌落伤寒沙门菌ATCC14028生长无色透明菌落福氏志贺菌ATCC12022生长无色透明菌落

二、SS琼脂【用途】用于分离沙门菌和志贺菌【配制方法】称取购买的梅里埃公司的SS琼脂粉g溶解于400ml蒸馏水中，煮沸待完全溶解，冷却至50℃，倾倒平板。冷却后，放冰箱保存。【质量控制】选择性生长：大肠埃希菌ATCC25922部分抑制生长红色混浊菌落伤寒沙门菌ATCC14028生长落中心黑色菌

三、沙保弱琼脂【用途】用于分离真菌【配制方法】称取购买的梅里埃公司的沙保弱琼脂粉g溶解于400ml蒸馏水中，经高压灭菌后（121℃15分钟）冷却至50℃，倾倒平板，冷却后，放冰箱保存。【质量控制】选择性生长：白色念珠菌ATCC10231生长大肠埃希菌ATCC25922生长部分或完全抑制

四、双糖【用途】用于鉴定细菌分解葡萄糖和乳糖的试验。【配制方法】称取购买的梅里埃公司的双糖琼脂粉g溶解于500ml蒸馏水中，煮沸待完全溶解，分装试管，每管约4ml，塞上塞子，包装后高压灭菌（121℃15分钟）后取出，放置斜面，冷却后，放冰箱保存。【质量控制】质控菌ATCC25922大肠埃希菌A/AATCC27853铜绿假单孢菌K/K阴沟肠杆菌K/A奇异变形杆菌K/HS

五、半固体【用途】用于观察细菌的动力。【配制方法】称取购买的梅里埃公司的半固体琼脂粉g溶解于400ml蒸馏水中，煮沸。待完全溶解，分装试管，每管约2-3ml，塞上塞子，包装后高压灭菌（121℃15分钟）后取出，冷却后，放冰箱保存。【质量控制】质控菌阳性对照ATCC27853铜绿假单孢菌阴性对照肺炎克雷伯菌

培养基的制培养基制备的注意事项1.在调配溶解培养基成分时，可先在烧瓶加入少量蒸馏水，再加入其他成份，以防止加热时瓶底烧结。2.制备培养基不可用铁、铜器皿，以免铁、铜离子进入培养基抑制细菌的生长或细菌毒素的产生。3.需要在培养基中加入染料、胆盐、指示剂等，应在校正pH后加入。4.倾注平皿时，不应将平皿盖全部打开，以免空气中的尘埃及细菌等落入平皿中。5.倾注平皿时，应恰当把握培养基的温度。温度过高，冷凝水过多，不易分离细菌；温度过低，部分琼脂凝固，平板高低不平。