花生抗白绢病鉴定技术规程.pdf

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花生白绢斑病鉴定技术规程

1范围

本文件规定了花生抗白绢病（SclerotiumrolfsiiSacc.）鉴定技术的病原物分离、接种体制备、室内

抗性鉴定、田间抗性鉴定、病情调查、抗性评价、鉴定记载方法等。

本文件适用于花生（ArachishypogaeaL.）品种及种质资源对花生白绢病抗性的室内、田间鉴定及

评价。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

NY/T2391农作物品种区域试验与鉴定规程花生

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4试剂、材料与仪器设备

4.1PDA培养基

称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加入1000mL水，煮沸20min—30min，纱布过滤，补水至1000mL，

再加入18g琼脂和18g葡萄糖，搅拌均匀，高压灭菌（121℃，20min）。

4.2恒温培养箱：（25+2）℃。

4.3电子天平：感量0.01g。

4.4超净工作台。

4.5高压灭菌器。

4.6冷藏箱（-4℃）。

4.7低温冰箱：最低温度-40℃。

5病原物分离与接种体制备

5.1病原物分离

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从具有白绢病典型症状的花生植株上小心收集茎秆基部的菌核，将收集到的菌核用75%乙醇处理30

s，30%次氯酸钠处理2min进行表面消毒，将消毒后的菌核用无菌水冲洗后于无菌环境中自然风干，将

风干后的菌核置于PDA平板培养基表面，于25℃培养箱内培养至菌核萌发，产生菌丝，观察菌丝和菌

核形态，结合LSU序列比对，鉴定为齐整小核菌(SclerotiumrolfsiiSacc.)，经致病性测定后确定为供接

种菌株。于4℃条件下保存，或20%甘油中-40℃条件下长期保存，备用。

5.2接种体制备

菌株接种于PDA培养基上，25℃黑暗条件下培养至长出菌丝。从菌落边缘取菌饼转移至装有灭菌

燕麦粒的500mL三角瓶中，置于25℃培养箱中培养至菌丝长满所有燕麦粒，备用于接种。

6室内抗性鉴定

6.1室内植株准备

在长宽高为10cm×10cm×8cm的花盆中播种籽粒饱满的花生种子3粒，定期浇水，15d后进行接种。

6.2接种

将带菌燕麦粒埋入花生茎基部周围2cm深的土层中，1g/株。

6.3接种后管理

接种后的植株同接种前管理。

6.4病情调查

接种4d后开始病害调查，间隔2d调查一次，调查2周。

6.5调查方法

目测每份鉴定材料发病状况，根据病害症状描述，调查记载病情级别。

6.6病情分级

病情分级及其对应的症状描述见表1。

表1花生品种抗白绢病鉴定病情级别划分标准

病情级别病害症状描述

0植株无病症状；

1仅茎上有病斑；

2全株≤25%以下表现系统症状；

326%50%

全株—表现系统症状；

4全株≥50%表现系统症状；

7田间抗性鉴定

7.1抗性鉴定圃设置