第1章 发酵工程:第2节第2课时 微生物的选择培养和计数.pdf

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第1章发酵工程:

第2节微生物的培养技术及应用第2课时微生物的选择培养和计数

学有目标

记在平时——核心语句必背

——新课程标准必明

1.实验室中微生物筛选的原理:人为提供有利于目的菌生长的条件

1.阐述选择培养的原(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。

理。2.在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻

2.举例说明通过调整培止其他种类微生物生长的培养基,称为选择培养基。

养基的配方可有目的地3.测定微生物数量的常用方法有活菌计数法和显微镜直接计数法。

培养某种微生物。稀释涂布平板法常用来统计活菌的数目,但统计结果往往比活菌的

3.概述测定微生物数量实际数目少。

的方法。4.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,因此可用尿素作为唯

一氮源的选择培养基分离能分解尿素的细菌。

[理清主干知识]

一、选择培养基

1.微生物筛选的原理:人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度、pH等),

同时抑制或阻止其他微生物的生长。

2.选择培养基:在微生物学中,允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种

类微生物生长的培养基。

二、微生物的选择培养

土壤取样―→梯度稀释―→涂布平板―→培养观察

三、微生物的数量测定

1.稀释涂布平板法

(1)原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个单菌落,来源于样品稀释

液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。

(2)注意事项

①一般选择菌落数为30~300的平板进行计数。

②通常选用一定稀释范围的样品液进行培养,以保证获得菌落数为30~300、适于计数

的平板。

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③在同一稀释度下,应至少对个平板进行重复计数,然后求出平均值。

④统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。这是因为当两个或多个细胞连在一起时,

平板上观察到的只是一个菌落。因此,统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。

2.测定微生物数量的另一种常用方法:显微镜直接计数法。

四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

1.原理

绝大多数微生物都能利用葡萄糖,但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用

以尿素作为唯一氮源的选择培养基,可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。

2.实验设计

(1)土壤取样:铲去表层土,在距地表3~8cm的土壤层取样。

(2)样品的稀释:测定土壤中细菌的数量,一般选用1×10456

、1×10和1×10倍稀释的

稀释液进行平板培养。

(3)微生物的培养与观察:细菌一般在30~37℃的温度下培养1~2d。每隔24h统计

一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果。

[诊断自学效果]

1.判断下列叙述的正误

(1)选择培养基可以鉴定某种微生物的种类(×)

(2)稀释涂布平板法既能分离细菌,也能对细菌进行计数(√)

(3)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素(√)

(4)筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一氮源(√)

2.(2020东营·一模)某些土壤细菌可将尿素[CO(NH)]分解为CO和NH供植物吸收

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