新版实验大肠杆菌的培养和分离.pptxVIP

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微生物;单细胞原核,分支状菌丝(基内~、气生~);单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,就会形成一个肉眼可见,含有一定形态结构子细胞群体(种群)

菌落是判定菌种主要依据;芽孢:细菌休眠体

;结构

异养型,兼性厌氧型,革兰氏阴性(红色)(G-)

物质(元素)组成:CHONPS…;按照微生物对营养物质不一样需求,配制出供其生长繁殖营养基质。;成份;消毒:较为温和方法,如酒精

注:消毒不能杀死芽孢

灭菌:强烈,全部,完全无菌

灭菌消毒技术是微生物相关工作中最普通也是最主要技术。;1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min

2、巴氏消毒法:70-75℃下煮30min或80℃下煮15min(牛奶)

3、化学药剂消毒法:用70%酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源

4、紫外线消毒(空气);(2)惯用灭菌方法:;称量-计算-溶化-灭菌-倒平板

灭菌:加上封口膜,用牛皮纸包好放在高压蒸汽灭菌锅中灭菌,1Kg压力灭菌15Min

;倒平板

;紫外灯,过滤风,酒精灯,酒精棉球

在火焰旁右手3指拿锥形瓶,2指拿封口膜

使锥形瓶瓶口快速经过火焰

左手将培养皿打开一条缝隙,右手将培养基倒入培养皿,立刻盖上皿盖

待平板冷却凝固后,将平板倒过来放置

;从大肠杆菌斜面→锥形瓶中液体培养基

接种好后在37度摇床振荡培养12h

工具:接种环在接种前要灭菌

;分离方法:平板划线分离法

原理:经过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线操作,将聚集菌种逐步稀释分散到培养基表面。在数次划线后,能够分离到由一个细胞繁殖而来肉眼可见子细胞群体,这就是菌落。

只能蘸一次、再次划线从上次末端开始、划好倒置培养1-2天、划线末端出现不连续单个菌落

;

;新版实验大肠杆菌的培养和分离;;新版实验大肠杆菌的培养和分离;新版实验大肠杆菌的培养和分离;1.为何在操作第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,依然需要灼烧接种环吗?为何?;2.在灼烧接种环之后,为何要等其冷却后再进行划线?;将单菌落用划线法接种到斜面,37度培养24h后放入4度冰箱保藏;分离另一个方法:稀释涂布平板法;分离另一个方法:稀释涂布平板法

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