竹黄孢子的保藏方法.pdf

竹黄孢子的保藏方法

竹黄孢子的保藏方法

本发明公开了一种竹黄孢子的保藏方法，将竹黄孢子刮取至

干净的牛皮纸袋中待处理；将装有竹黄孢子的牛皮纸袋放入

4℃冰箱，保存7天后取出，获得干燥的孢子块；用干净的

玻璃瓶装入菜油，将装有菜油的玻璃瓶放入蒸锅蒸1小时，

取出后自然冷却至室温备用；将得到的干燥孢子块放入处理

好的菜油中进行保存；下一年竹黄接种时期，将保存竹黄孢

子的菜油倒掉，加入凉开水洗涤孢子块1～2次，然后用凉

开水浸泡2小时便可得到竹黄孢子液。本发明既可以使竹黄

孢子顺利度过野外的不良环境，有效保证竹黄孢子的活力，

又能克服常规菌种保藏方法不适合竹黄孢子保藏的问题，从

而为竹黄人工栽培提供种源保障，解决竹黄人工栽培推广中

接种体保藏的关键技术问题。

【专利说明】竹黄孢子的保藏方法

【技术领域】

[0001]本发明涉及生物【技术领域】，尤其是一种竹黄孢子

的保藏方法。【背景技术】

[0002]竹黄Aaffi/wsicoJa)又名天竹花、淡竹花、竹花、赤

团子、竹赤团子、竹苗、竹赤斑菌、淡菊花、竹参、竹三七、

血三七等，是长在竹子枝条上的一种药用真菌的子座。其主

要成分竹红菌素是竹黄中红色色素部分，是多种花醌

(Perylenequinones;PQ)类衍生物的混合物，是一种新型的

光敏剂，在我国应用于临床治疗皮肤病、胃病和风湿性关节

炎。现代医学研究表明，竹红菌素的药用价值主要体现在抗

炎、镇痛、抗菌、抗肿瘤等方面，尤其是近年来的研究已经

体现出它在治疗肿瘤等方面的优良特性。我国已经研制的成

药有:真菌竹黄胶囊、竹红菌素软膏和竹黄菌颗粒剂，在治

疗妇科病、风湿性关节炎和牛皮癣等方面表现出较好的临床

疗效。

[0003]竹黄的生长季节一般为4月下旬到6月。通常情况下，

竹黄子座每年4月底开始出现在寄主竹子上，随后逐渐膨大，

在子座膨大过程中，大量的分生孢子产生并被释放出来。

[0004]由于竹黄孢子只在自然条件下产生，不能通过实验室

培养获得，且自然存活率低。通过实验室常规的甘油保存法，

_20°C保存2月后竹黄孢子的萌发率为17%，-20°C保存I

年后竹黄孢子的萌发率仅为3%。

[0005]竹黄菌在实验条件下很容易被分离出来并获得纯培

养，但是至今还未发现该真菌在培养条件下可以产生分生孢

子或子囊孢子，甚至在各种诱导条件下也未观察到孢子产生。

近年来，竹黄的人工栽培已获得成功(专利受理

号:201310056130.2)，但是，目前的接种技术还只限于采用

竹黄孢子进行接种，人工栽培竹黄的种源只能依靠野外产生

的竹黄孢子。因次，竹黄孢子的收集和保藏对于竹黄人工栽

培种源生产和扩大栽培具有很大的影响。竹黄人工栽培的扩

大和推广亟需找到简单易行、既能保证孢子萌发率，又能常

规推广的竹黄孢子保藏方法。

[0006]常见的真菌孢子保藏方法有低温干燥保存、石蜡油保

存、甘油低温保存等，但这些方法都限于在实验室进行。针

对竹黄人工栽培所需孢子接种材料的特点及推广需求，亟需

解决竹黄孢子的保藏问题，以确保竹黄人工栽培的种源和扩

大推广栽培。

[0007]微生物保藏的最终目的是保持菌株的纯度、活性、基

因信息的完整性、避免菌株变异和降低退化。适用于真菌的

保藏技术方法主要分为三类:

(I)让真菌连续生长的保藏技术，特点是不断地将菌株移

植在新鲜的培养基上，并在合适的条件下生长，随后至于一

个低温的环境中，一般是4°c~10°C，这类保藏技术主要包

括斜面移植、油管保藏和蒸馏水保藏等方法。

[0008](2)利用干燥环境保藏菌株的休眠体，如分生孢子、

厚垣孢子等，干燥选用的基质可以是空气、硅胶、土壤、沙

子等。

[0009](3)利用抑制菌株代谢活性的办法达到长期保藏，一

般是通过脱水降低细胞内水分或低温冷冻，此过程关键环节

是避免和降低冰晶细胞造成的伤害，这类保藏工艺包括冷冻

干燥法、低温冻结和液氮保藏法等。

[0010]以上方法的保藏效果不仅存在菌株水平上的差异性，

同时只适合于实验室菌种保存，尚不能针对竹黄这一真菌种

类作为栽培推广过程的接种体保藏工艺技术。

【发明内容】

[0011]本发明的目的是:提供一种竹黄孢子的保藏方法，它

能有效缩短输电线路的等效长度，实现在相同融冰电压下对

更长距离的输电线路进行融冰操作，以克服现有技术的不足。

[0012]本发明是这样实现的:竹黄孢子的保藏方法，包括以

下步骤:

(1)竹黄孢子的收