初始污染菌校正因子的测定报告（模板）.pdfVIP

初始污染菌校正因子确认报告

1.概述

公司制定的《初始污染菌检验规程》是用于描述产品中的活微生物群体。但准确地确定初

始污染菌是不可能的，因此，在实践中，采用校正因子将活菌计数转换成产品中初始污染菌

评估，此因子用于补偿洗脱效率。

2.检验依据

ISO11737.1-2006医疗器械的灭菌微生物方法第1部分：产品上微生物总数的测定方

法进行测定。

中国药典2015版第四部1105非无菌产品微生物限度

3.实验过程

3．1洗脱液的制备：分别选取三支新制备的样品，在净化工作台上，用无菌医用钳将每

支样品剪碎，称重10g，放入事先灭菌的具塞三角瓶中，加入约（样品重量×10）ml的pH7.0

氯化钠-蛋白胨灭菌洗脱液，加塞，充分震荡，使样品得到充分的洗脱，然后将洗脱液转移到

另一个无菌的具塞三角瓶中，立即盖好备用。

3．2营养琼脂培养基的制备：将营养琼脂培养基按说明书要求进行配制，在121℃高压

蒸气灭菌锅内灭菌15min，放入50℃左右的水浴中备用。

3．3接种：在净化工作台上，用移液管吸取1ml上述制备的洗脱液注入经过灭菌的平皿

内，将约15-20ml已融化的45℃左右的营养琼脂培养基倾注到平皿中，并立即旋摇平皿，使

水样与培养基充分混匀。同样方法每组洗脱液做10个平行试验，同时另用一个平皿只倾注

1ml灭菌洗脱液于营养琼脂培养基内作为空白对照。

3．4培养：待上述培养基冷却凝固后，翻转平皿，使低面朝上，置于36±1℃恒温箱中

培养48±2h。

3．5菌落计数：记录各平皿中的菌落数，取平均值，然后再乘以洗脱液总体积数（ml），

即得到洗脱液中的全部菌落数。

重复3.1-3.5步，分别进行第二次、第三次、第四次、第五次洗脱，其中第五次洗脱为

直接将四次洗脱后的产品接种于培养基内，将五次洗脱后所得的菌落数分别填入数据表1、

表2。

4.校正因子的计算

用第一次洗脱液得到的菌落数除以五次洗脱得到的总菌落数，得到第一次冲洗去除率，

取三个样品的第一次冲洗去除率的平均值，平均值的倒数即为校正因子。

5.结论

由表1、表2可知，照此检查方法和检查条件进行湿化鼻氧管的校正因子的测定，其结

果分别为1.31。

表1

湿化鼻氧管校初始污染菌

测定项目样品1样品2样品3

第一次洗脱9610089

第二次洗脱272118

第三次洗脱988

第四次洗脱000

（直接培养）

000

第五次洗脱

空白对照000

表2

湿化鼻氧管校正因子测定数据表

测定项目样品1样品2样品3

第一次洗脱9610089

第二次洗脱272118

第三次洗脱988