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两面针的提取分离工艺研究进展
(华中科技大学应用化学1002班)
摘要:
两面针是组分相当复杂的体系,其有效成分是其发挥疗效的物质基础,而现
代中药两面针的发展过程中,对有效成分的提取、分离和纯化这一复杂工作的要
求也越来越高,从天然药物中提出分离出单体并发展成新药或为先导化合物提供
参考是中药开发工作中的重要内容,在传统提取分离基础上,近年来越来越多新
型技术不断被开发和应用,具有明显的优越性。
关键词:两面针;有效成分;提取;分离
两面针药材性味辛、苦、微温,小毒,具有祛风通络、胜湿止痛、消肿解毒等作用,其中生
物碱为重要活性成分,具有抗肿瘤、诱导白血病细胞分化作用。
两面针有效成分的提取和分离对于其有效的机理、降低毒性、提高疗效、改进剂型、控
制生产质量以及新药开发均有重要意义。有效成分提取的过程就是将溶剂渗入细胞内,将存
于细胞内容物中的生物碱、糖类、苷类、酮类等有效成分溶解于溶剂中,随着细胞内外的浓
度差而扩散至细胞外,直至达到动态平衡,通过多次输入新的溶剂,而将大部分有效成分溶
出。传统提取方法存在溶剂使用量大、提取效率不高、周期长、劳动力耗费多、有效成分损
失多等缺点,而一些新技术方法的出现在一定程度上解决了这些问题,具备广阔的应用前景,
本文对传统经典的提取分离方法及新兴技术进行阐述。
1传统提取分离方法
1.1煎煮法
煎煮法是使用最早也是最广泛的传统提取方法,通过对药材进行加热煮沸而提取有效成
分,但是不溶于水的有效成分损失较大,不适于挥发性成分和易被加热破坏的成分,提取前
宜用冷水浸泡60min以上,具体煎煮的时间和粉碎的粒径依据要两面针本身的质地、硬度、
成分等情况而定。
1.2渗漉法
在工业上,两面针药膏的提取方法有浸泡、回流、渗漉提取等方法,其中以渗漉和回流提
取法为主。渗漉提取使用的溶剂很多,如水、乙醇、甲醇、丙酮等,但多以乙醇为主要的提取
溶剂。在渗漉提取的过程中,所用的乙醇体积分数、浸泡时间和渗漉体积流量等对两面针中
新棒状花椒酰胺提取的影响很大。试验研究发现,不同的提取条件,两面针中新棒状花椒酰胺
差别很大。当乙醇体积分数为95%、浸泡时间为72h、渗漉体积流量为3.9mL/min时,两面
针提取液中新棒状花椒酰胺的提取率最高为0.74%;当乙醇体积分数为50%、浸泡时间为24
h、渗漉速度为1.3mL/min时,两面针提取液中新棒状花椒酰胺的提取率最低,为0.031%。
1.3回流法
两面针总生物碱最佳提取工艺为:先将药材粉碎成粗粉,以体积分数60%乙醇5g·L
-1盐酸为溶剂回流提取3次,各次溶剂量分别为6,5和4倍,回流时间分别为1,0.5和
0.5h,总生物碱提取率为94.7%。有文献采用甲醇加盐酸索氏提取法测定两面针药材。生
物碱含量,但经实验发现,回流法提取得到的总生物碱比索氏提取法高。以体分数60%乙醇
为溶剂按本工艺提取,总生物碱提取率为68.29%。回流工艺加酸于提取溶剂中进行回流提
取,总生物碱提取率提高20%以上。该结果表明,两面针药材使用加酸加热回流法比加热回
流提取工艺所得到的氯化两面针碱提取率要高得多。
两面针药材的两种不同回流提取工艺方法
提取方法溶剂
乙醇加热回流75%乙醇溶液
乙醇加酸加热回流75%乙醇溶液加0.3%盐酸溶
液
2现代中药提取分离技术
2.1硅胶柱层析
取两面针药材,用95%乙醇温浸提取,减压回收乙醇得稠浸膏,此浸膏用2%盐酸水溶液
反复搅溶,直至酸液呈微弱的生物碱反应为止,酸水液过滤,合并,用2%NaOH液碱化至pH9—
10,用氯仿萃取,回收氯仿得总碱(60g),经反复硅胶柱层析及重结晶方法,得到化合物。具体可
以查阅《两面针中化学成分的分离鉴定及活性测定》樊洁等。
2.2D001AM树脂及D-101大孔树脂提取分离
取D001AM树脂,加入回流提取的氯化两面针碱,在25℃环境下中进行搅拌吸附24
h,吸附饱和后,树脂用去离子水进行除杂,去离子水的用量为8BV。树脂晾干后先用
4%NaHCO3-25%EtOH溶液
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