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siRNA抑制ZNF139对人胃癌裸鼠原位移植瘤增殖影响的研究的开题报告
一、研究背景
胃癌是全球范围内常见的恶性肿瘤之一。尽管在治疗上取得了一些进展,但其治愈率依然较低。因此,寻找治疗胃癌的新途径和新靶点尤为重要。ZNF139是细胞核内的一个结构域转录因子,在多种肿瘤中均被发现高表达。此外,之前也有研究发现siRNA抑制ZNF139可抑制人类结肠癌细胞增殖,并且降低了ATP含量、葡萄糖的利用和乳酸的产生,但其对胃癌的治疗效果尚未被研究。
二、研究内容和目的
本研究旨在探究siRNA抑制ZNF139对人胃癌裸鼠原位移植瘤增殖的影响,以期为胃癌治疗的新策略的开发提供实验依据。
具体研究内容为:利用siRNA技术抑制ZNF139的表达,构建裸鼠胃癌原位移植瘤模型,检测siRNA抑制ZNF139对裸鼠胃癌原位移植瘤增殖和肿瘤相关蛋白表达的影响。
三、研究方法和技术路线
1.裸鼠胃癌原位移植瘤模型的建立:采用BALB/c裸鼠,将裸鼠脾细胞和HGC-27肿瘤细胞混合,注射于裸鼠的右侧腋下,建立裸鼠胃癌原位移植瘤模型。
2.siRNA转染:采用Lipofectamine2000试剂将设计的ZNF139的siRNA转染到HGC-27细胞,并使用Westernblotting分析siRNA转染后ZNF139蛋白表达的抑制率,选出最佳转染浓度。
3.PCR检测:使用Real-timePCR检测转染siRNA的细胞内ZNF139mRNA表达量。
4.细胞生长抑制检测:使用MTT法检测siRNA转染对HGC-27细胞的生长状态影响。
5.Westernblotting检测肿瘤相关蛋白的表达变化。
6.同步检测裸鼠胃癌原位移植瘤的生长状态和肿瘤相关蛋白的表达变化。
四、预期成果
通过实验结果,预期得出是否通过siRNA技术抑制ZNF139可以有效抑制胃癌裸鼠原位移植瘤的增殖,并对裸鼠胃癌原位移植瘤生长过程中一些关键肿瘤相关蛋白的表达进行深入分析,为胃癌治疗的新策略提供实验依据。
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