土源性线虫病诊治幻灯片.pptxVIP

第三部分

肠道寄生虫病病原学检查方法;生理盐水直接涂片法适用于检查原虫的滋养体和多种蠕虫卵。碘液直接涂片法适用于检查原虫的包囊。本法虽简便、快速，但由于取材少，如果粪便中含虫卵或原虫数量少时，往往会漏检，因此1份粪便以做3张涂片法为宜。操作步骤如下：;(一)配制试剂

1.生理盐水配制：称取氯化钠8.5g，溶于1000ml蒸馏水中即可。或称取氯化钠0.9克，溶于100毫升蒸馏水中，即可使用。

2.碘液配制：

分别称取4g碘化钾和碘2g，并量取蒸馏水100ml，先将碘化钾溶于水中，然后再加碘，溶解后贮于棕色瓶中备用。;(二)材料

载玻片；

盖玻片20毫米×20毫米；

木制小签或白金耳（0.46毫米，镍、铬的合金金属）；

玻璃铅笔；

氯化钠溶液；

卢戈氏碘溶液，

稀释5倍。;(三)操作步骤：

取一玻片：

—滴一滴氯化钠溶液于玻片左侧中央；

—滴一滴碘溶液于玻片右侧中央。;2.用木制小签或白金耳采取一小份粪便（大约像黄豆粒大小）。如果粪便为：

—成形的话，则要从粪便的深部和表面各取一些标本；

—含有粘液或为液体状，可从带血的粘液表面或液体表面采取标本。;4.用木制小签或白金耳，从标本采取第二份粪便与一滴碘溶液混合。;6.用玻璃铅笔在玻片上划出标本的编号。;7.在显微镜下检查标本，检查盐水标本要使用10倍和40倍的物镜及5倍或6倍目镜。检查碘溶液标本使用40倍的物镜。由于卵和包囊是无色的，故要降低光量，使用聚光镜光阑，或降低聚光镜以加强对比度。;8.用10倍的物镜检查第一个标本。如图所示，从左手上角开始检查。;为了保证不至于漏掉某一视野范围，可在视野的边缘上选择一目的物，并移动玻片使其通过整个显微镜检测视野，直到该目的物到达视野的另一边缘为止。在全部检测面积上，要重复这种操作程序。;加藤厚涂片法是50年代日本加藤氏首先提出，是用在甘油透明液中浸泡过的亲水玻璃纸替代盖玻片。该法一次检查粪便量是直接涂片法的20倍以上。由于检出率比直接涂片法高，而且简便、省时、费用又少，故特别适用于集团检查。本法可以检查粪便中各种寄生虫卵。;1972年Katz等设计出圆孔???卡片纸作定量，使该法既可作定性检查又可作定量检查。故自此以后该法称为Kato-Katz厚涂片法，国外现多用塑料板作定量板，规格为30mm×40mm×1.37mm，中央孔圆直径为6mm，圆孔的容积为38.74mm3。;我国用于全国人体重要寄生虫病现状调查的塑料定量板，中央孔为圆台形，规格为30mm×40mm×1mm，中央圆台形孔上端直径为3mm，孔下端直径为4mm，容积为38.75mm3，可容粪便41.67mg。计算每克粪便虫卵数（EPG），只要将每片读得的虫卵数乘以24即可。;(一)改良加藤厚涂片法（Kato-Katz法）

1.材料

透明液（蒸馏水100ml＋纯甘油100ml＋3%孔雀绿1ml);

亲水性透明玻璃纸需在透明液中浸泡24小时以上；

尼龙绢片（80目或100目）或金属丝网（60或80目）片，大小约为5×5cm；

圆台形孔塑料定量板；

塑料刮片。;2.操作步骤：

(1)尼龙绢（5cm×5cm）放在粪便上，用刮片刮取粪便；;(3)小心取下定量板，则粪样就留在载玻片上；取一张透明液浸泡好的亲水玻璃纸，抖掉多余的浸泡液后盖在粪便上。;(5)待粪便透明后及时镜检;4.注意事项

Kato-Katz厚涂片在室温25℃，75%湿度下，涂片放置不宜超过2小时，若温度低，空气湿度大，涂片放置时间可适当延长。在南方温度高的地区或西北气候干燥地区涂片放置时间要缩短，常放置1小时或半小时即可镜检，甚至涂片制好后马上就可检查。总之只要涂片透明了就要及时镜检。否则薄壳虫卵因透明过度而看不清，造成漏检或误检。;(二)加藤厚涂片法（Kato厚涂片法）

加藤厚涂片法操作步骤更简单，不用定量板也不用尼龙绢过滤粪便，比改良加藤厚涂片法减少了(1)、(2)二个步骤。;本法主要用于检查钩虫卵、毛圆线虫属线虫卵。

(一)材料：

1.浮聚瓶

高约3.5cm，直径约2cm的平底直筒玻璃瓶，也可用青霉素瓶代替。

2.饱和盐水

饱和盐水的配制：将食盐徐徐加入盛有沸水的烧瓶中,不时搅拌至食盐不再溶解为止。一般100ml沸水需加40g左右食盐，冷后取上清液使用。;(二)操作步骤：

1.自粪便不同处挑取如蚕豆大小的粪块，置于盛有少量饱和盐水的漂浮管中;3.将满时，改用滴管，加至略高于管口但不溢出为止。;5.如图垂直向上提起载玻片;本方法主要