- 1、本文档共9页,可阅读全部内容。
- 2、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
【共识解读】mNGS应用于感染性疾病病原检测中国专家共识
一、共识制定过程
第一轮评议专家共34位,其中临床专业〔包括感染、呼吸、重症〕
6位,微生物学专业28位。初稿推举共识条目共38条。对争议比较大的共识条目,不再推举。细节建议争论后纳入。
其次轮评议专家共38位,其中临床专业〔包括感染、呼吸、重症等〕20位,微生物学专业18位。评议选项明确包括:同意、不同意、弃权。规章:90%以上全都同意,则该共识描述为“建议”。70%~90%同意,则该共识描述为“考虑”。70%以下则不纳入共识推举。
二、分类和术语
〔一〕分类
宏基因组高通量测序技术〔metagenomicnext-generationsequencing,mNGS〕通过对临床样本的DNA或RNA进展鸟枪法测序,可以无偏倚地检测多种病原微生物〔包括病毒、细菌、真菌和寄生虫〕。二代和三代测序平台均可用于该项技术。按从临床样本中提取的核酸类型可以分为宏基因组测序和宏转录组测序。依据测序模式可以分为单端测序和双端测序。
〔二〕术语和定义NGS:也称高通量测序,是一种可以同时对数十万到数百万条
DNA分子序列进展读取的测序技术。
mNGS:m指宏基因组,也称元基因组,是标本中全部生物〔人、微生物〕基因组的总称。mNGS指对标本中的全部生物基因组进展NGS分析。在感染性疾病诊断领域中,侧重于微生物基因组的识别和分析。
诊断宏基因组学:指用于临床诊断目的的宏基因组学。该词字面含义仅指诊断,但实际上包括临床治疗、感染掌握等。
临床宏基因组学:含义与诊断宏基因组学类似,但应用场景更为
广泛。二者比较,专家建议用“临床宏基因组学”,由于“诊断”一词无法包括治疗、感控、流行病学等信息。
微生物组:指某一个系统、生态环境或特定区域中全部微生物的总和。生物医学领域常常是特指存在于人体特定环境中全部微生物遗传物质的总和。例如,人体的肠道微生物组是人体肠道全部微生物遗传物质的总和。
试剂盒基因组:指来自核酸提取、文库制备等步骤试剂的核酸,来源如工程菌残留等,也可泛指检测过程中的核酸污染。
游离脱氧核糖核酸〔cell-freeDNA,cfDNA〕:循环中的cfDNA分子来源于濒死的人类细胞和定植或侵入的微生物,它们在分解时将核酸释放到血液中。
读长:测序仪单个测序反响所得到的碱基序列。读长长度指该碱基序列的碱基数。读长数量指测序获得的碱基序列的数量。检测报告中常列出某微生物种属名下的读长数,即针对该微生物种属特异性片段的数量,一般是原始序列数据经过过滤,去除了接头和低质量读长后的净读长数量。
文库:在遗传学领域特指某分子生物学技术创立/生成的假设干基因片段的集合,本共识中主要指测序文库。通过文库制备步骤,可以将基因组DNA样本〔或cDNA样本〕转换为测序文库,然后可在测序仪器上进展测序。文库制备包括DNA样本的随机片段化,和为每个DNA片段连接5′和3′接头。
比对:指将测序的读长与参考基因组进展匹配的过程。
深度:指比对到参考序列的碱基平均测序次数。例如,30倍测序深度意味着基因组中的每个碱基平均被测序了30次。深度越高,检出碱基的可信度越高。
掩盖率:指到达给定深度的测序碱基占整个基因组或目标区域的百分比。没有到达给定深度的局部称为盲隙〔Gap〕。通常同时使用掩盖率和深度描述测序结果。
相对丰度:指除去宿主序列之后,某微生物物种序列在相应大类物种〔通常分成细菌、真菌、病毒、寄生虫4大类〕中的分布比例。
丰度越高,表示该物种所占比例越高。它只能指示同一样本中某个物种的相对的量,不能用于不同样本之间的比较。
Q值:指质量分值,用于衡量测序准确度。Q=-10log10P,其中P代表该碱基被测序错误的概率。如Q20表示该碱基检测错误的概率为1%。
标定比照:指检测体系中参加序列〔肯定浓度、肯定序列〕,用以推断检测结果可信度或作为参比,是测序检测中一种特别的阳性
比照。
无模板比照:一般是以焦碳酸二乙酯〔diethylpyrocarbonate,DEPC,一种RNA抑制剂〕处理后的去离子水〔DEPC-ddH2O〕为样本,抱负状况下应没有DNA或RNA模板,用以指示检测过程中的核酸污染状况。
检出限〔limitofdetection,LOD〕:指检测对象可以被某特定方法牢靠地检测到的最低浓度〔严格意义上是到达某概率的最低检测浓度〕。
正常无菌部位:指传统微生物学观念中,正常生理状况下没有细菌或其他有活性微生物存在的人体部位,通常也称无菌部位。如血液
您可能关注的文档
最近下载
- 20201127天空课堂初一数学 精品推荐 初一数学(人教版)木杆与重物实验问题.pptx VIP
- 机器学习-PPT课件(全).pptx
- 佛山一中2020级高二上学期第一次段考物理(选考)试题及答案.doc VIP
- 22G101三维图集(1)-优质文档推荐.pdf
- 灰尘的旅行总复习测试1.docx
- 大单元教学实践的反思与总结.pptx VIP
- 人教版(2024新版)七年级上册英语全册教案.DOCX
- 食品生产企业食品安全主要主体责任清单、每日食品安全检查记录.pdf VIP
- 部编版初中语文(七上)第一单元教学反思.docx VIP
- 初中历史 人教课标版(部编) 八年级上册 第25课 经济和社会生活的变化 回望张謇—看中国近代民族工业的曲折发展 课件.pptx
文档评论(0)