食品微生物学.pptVIP

食品微生物学培训主要内容微生物实验室的技术性管理2010新微生物标准变动微生物实验室技术性管理实验室环境实验室设备培养基与试剂标准菌株实验室安全实验室环境总原则：环境不影响检测结果准确性实验室面积与工作量匹配实验室区域与办公区域分开单方向工作流程，避免交叉污染卫生指标项目：洁净工作台和洁净室致病菌分离鉴定：生物二级实验室（biosafetylevel2BLS-2）实验室设备设备配置与检测量和检测类型相适应（例如：粪大肠菌群44.5±0.2℃）检测设备放置在适宜条件下(显微镜)，便于维护、清洁、消毒与校准，并保持整洁与良好的工作状态定期进行检查和检定（加贴标识）、维护保养，应有日常监控和使用记录高压灭菌器每次灭菌时，放置的物品不宜过于拥挤，物品之间应留用一定空间；最好使用不同的高压灭菌器消毒培养基和实验后废弃物每次灭菌时，应对灭菌效果进行监控并记录：每次使用应记录灭菌温度及时间；每周检查清洁排气滤网、密封阀等；清洁内部,去除水的沉淀物或培养基,使用去离子水；操作前接受专门培训每年进行一次检定；定期对灭菌效果进行验证：化学指示胶带;生物指示剂：湿热脂肪杆菌均质器每次使用后进行清理，保洁；每次使用时注意保持均质袋的密封确保使用无菌的均质袋，定期对无菌袋进行无菌检查冰箱和冰柜对于存放样品和标准菌株的冰箱和冰柜，每天进行温度核查并记录分区存放每半年至少进行一次冰箱和冰柜除霜、清洁和消毒培养基与试剂可参照GB/T4789.28规定执行编制关键培养基和试剂质量控制程序：明确那些培养基和试剂是关键试剂，应进行技术性验收（选择性固体培养基、血平板、诊断学清、抗生素、生化鉴定管）规定验收的方法（标准菌株划线接种，菌落特征；标准菌株进行玻片凝集试验；抑菌试验；标准菌株接种生化管观察反应现象）规定判定标准以上技术性验收试验需编制相应记录表格进行记录（每批进行）；例：培养基质量控制程序举例（商业培养基与自制培养基）菌株编制菌株管理程序：购置要求验证和评估试验方法活化、传代方法，同时确认（生化鉴定），有相应记录保存方法、条件并记录工作菌株使用前确认，传代不超过5代。使用记录销毁记录（方法，时间，人员签字）标识要求：名称、来源、标准号、接种日期、所传代数编制标准（参照菌株一览表）参考GB/T27045-2008附录A菌株保存方法方法1：甘油冻存法置细胞冻存管中，加入终浓度为15～20%的灭菌甘油，混匀，-80℃保存或冻干方法2：-60～-85℃玻璃珠保存法该方法可以对菌株连续保存，非常实用，但与冻干保存比较，该方法在资金和能源上的消耗较大。菌株保存方法使用不同颜色的玻璃珠有助于菌株的辨别。使用时只需取出一粒玻璃珠，放入含有所需培养基的试管或培养瓶中培养。在常规的液体培养基（一般需氧菌为营养肉汤，厌氧菌为强化梭状芽孢杆菌培养基(RCM)，嗜盐菌为加盐营养肉汤培养基）中混入15％的甘油得到需要的悬液培养基。整套保存系统在市场上有售(如Pro—LabDiagnostics公司的Microbank系统)。实验室安全废弃物处置编写废弃物处理指导书，对使用过的培养基分类进行处理，包括液体培养基、固体培养基、增菌培养基等意外情况的处理（包括感染性物质溢洒、擦伤等）编写微生物实验室应急处理规范，放于实验室内的醒目处2010微生物标准

（剩余样品或同批样品不进行微生物复检）

菌落总数（GB4789.2-2010）大肠菌群（GB4789.3-2010）沙门氏菌（GB4789.4-2010）金黄色葡萄球菌（GB4789.10-2010）乳酸菌（GB4789.35-2010）菌落总数主要区别：修改了英文名称修改了菌落总数计算公式中的解释修改了培养基和试剂（删除了NaOH和HCl）删除了第二法测试片法2010Foodmicrobiologicalexamination：Aerobicplatecount(食品微生物学检验)2008Microbiologicalexaminationoffoodhygiene:Aerobicplatecount(食品卫生微生物学检验)大肠菌群主要区别：修改了英文名称（同上）第二法：平板计数法菌落选择范围改为15-150CFU删除了第三法测试片法第二法：平板计数法第二法典型菌落：紫红色，菌落周围有红色的胆盐沉淀环，菌落直径为0.5mm或更大选菌落数在15-150之间