外源基因的表达及其优化策略专家讲座.pptx

生命科学学院第一节影响外源基因表示原因基因表示：从DNA分子有序地将其所承载遗传信息,经过密码子和反密码子系统,转变由特定氨基酸次序组成多肽或蛋白质分子过程，从而决定生物有机体遗传表型。外源基因的表达及其优化策略专家讲座第1页

生命科学学院第一节影响外源基因表示原因基因表示遗传信息从DNA到蛋白质传递过程——中心法则（centraldogma）。从DNA分子有序地将其所承载遗传信息,经过密码子和反密码子系统,转变由特定氨基酸次序组成多肽或蛋白质分子过程，从而决定生物有机体遗传表型。外源基因的表达及其优化策略专家讲座第2页

生命科学学院第一节影响外源基因表示原因克隆基因表示外源基因在宿主细胞中表示。外源基因表示载体重组载体导入宿主细胞在宿主细胞中表示出蛋白质提取蛋白宿主细胞：原核细胞或真核细胞外源基因的表达及其优化策略专家讲座第3页

生命科学学院第一节影响外源基因表示原因外源基因的表达及其优化策略专家讲座第4页

生命科学学院第一节影响外源基因表示原因影响外源基因表示原因主要有：阅读框架顺式作用元件翻译过程表示体系外源基因的表达及其优化策略专家讲座第5页

生命科学学院第一节影响外源基因表示原因一、阅读框架对转化基因影响什么是阅读框架(openreadingframe,ORF)?二、顺式作用元件对基因表示影响1.对基因转录起始调控1)开启子2)增强子3)缄默子外源基因的表达及其优化策略专家讲座第6页

生命科学学院第一节影响外源基因表示原因二、顺式作用元件对基因表示影响2.对基因转录终止调控1)终止子2)衰减子3.对DNA结构影响1)核基质结合区2)绝缘子3)基因座控制区外源基因的表达及其优化策略专家讲座第7页

生命科学学院第一节影响外源基因表示原因三、翻译过程对表示影响1.翻译起始对基因表示影响2.密码子偏爱性对基因表示影响3.翻译终止对基因表示影响四、表示系统对表示产物影响外源基因的表达及其优化策略专家讲座第8页

生命科学学院第二节外源基因在原核细胞中表示用原核生物作宿主。AdividingE.coli原核或噬菌体开启子MCSSD序列终止子外源基因的表达及其优化策略专家讲座第9页

生命科学学院第二节外源基因在原核细胞中表示一、原核生物细胞表示特点1.原核生物只有一个RNA聚合酶识别原核细胞开启子，催化全部RNA合成。2.原核生物表示是以操纵子为单位。操纵子是数个相关结构基因及其调控区结合，是一个基因表示协同单位。Z编码-半乳糖苷酶；Y编码-半乳糖苷透过酶；A编码-半乳糖苷乙酰基转移酶。外源基因的表达及其优化策略专家讲座第10页

生命科学学院第二节外源基因在原核细胞中表示外源基因的表达及其优化策略专家讲座第11页

生命科学学院第二节外源基因在原核细胞中表示乳糖操纵子(lacoperon)调控方式外源基因的表达及其优化策略专家讲座第12页

生命科学学院第二节外源基因在原核细胞中表示一、原核生物细胞表示特点3.原核生物转录与翻译是偶联，也是连续进行。每个核糖体可独立完成一条多肽链合成，即这种多核糖体能够同时在一条mRNA链上合成多条肽链，大大提升了翻译效率。4.原核细胞中缺乏真核细胞转录后加工系统。所以当克隆含有内含子真核基因在原核细胞中转录成mRNA前体后，其中内含子部分不能被切除。外源基因的表达及其优化策略专家讲座第13页

生命科学学院第二节外源基因在原核细胞中表示转录和翻译偶联、连续进行外源基因的表达及其优化策略专家讲座第14页

生命科学学院第二节外源基因在原核细胞中表示一、原核生物细胞表示特点5.原核生物基因控制主要在转录水平，这种控制要比对基因产物直接控制要慢。对RNA合成控制有2种方式：一是起始控制(开启子控制)，二是终止控制(衰减子控制)。6.在大肠杆菌mRNA核糖体结合位点上，含有一个翻译起始密码子及同16SRNA3’末端碱基互补序列，即SD序列。Shine-Dalgarno（S-D）sequence:含有一个启始密码子和一段同核糖体16SRNA3’末端碱基互补序列，叫Shine-Dalgarno（S-D）序列。外源基因的表达及其优化策略