动植物检验检疫学实验教学大纲.docx

《动植物检验检疫学》实验教学大纲

实验课程号：20710BOSY

课程属性：必修

实验属性：非独立设课

学时学分：总学时54、总学分3、实验学时18

实验应开学期：与理论课同时或稍后开设

先修课程：食品微生物学；食品微生物学实验技术；食品卫生微生物学检验；食品分析技术；食品现代分析与检测。

一、课程的性质与任务

通过进行各项检验检疫诊断操作，具体观察不同标本，分析实验结果，完成实验作业各环节，使学生巩固《动植物检验检疫学》课程所学的理论知识。

指导学生熟练掌握检疫诊断检疫性动物疫病和植物有害生物的最基本操作技能。培养分析问题和解决问题的能力。

培养学生树立严谨、细致、一丝不苟的工作作风，养成良好的实验习惯。

二、实验的目的和基本要求

了解动物检疫性重要疫病的病源特性，临床症状与病理变化特征、掌握其诊断与检疫操作技术。掌握重要植物检疫性害虫的基本特征，掌握主要植物检疫性病源微生物的鉴定特征及生物学特性，在植物果实上的症状特点和检验方法。

要求学生做到课前预习。明确实验目的、原理、内容及操作中注意事项，以保证实验的进度和效果。正确进行实验操作，得出可靠的结果，写出详尽、规范、完整的实验报告。

三、实验考核方式及办法

实验指导老师根据实验情况给出实验成绩，包括：出勤、预习提问、完成情况、实验效果、打扫卫生情况、实验报告等。

实验成绩按20-30%比例记入课程成绩。

缺做实验两次或缺交实验报告三次者，实验成绩已不及格论处，实验成绩不及格者，不得参加理论课考试。

四、实验项目一览表

《动植物检验检疫学》实验项目一览表

序号

实验项目名称

实验类型

实验要求

适应专业

学时

1

布氏杆菌的实验室诊断（凝集反应）

验证性

必作

食品质量与安全

3

2

炭疽的实验室诊断（沉淀反应）

验证性

必作

食品质量与安全

3

3

鸡新城疫的诊断及抗体水平检测

综合性

必作

食品质量与安全

4

4 真菌一般形态观察和临时玻片的制备实验

综合性

必作

食品质量与安全

4

5 检疫性植物害虫的形态观察

验证性

选作

食品质量与安全

4

6 鸡马立克氏病病毒的分离与初步鉴定

综合性

选作

食品质量与安全

4

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五、实验项目的具体内容：

实验一 布氏杆菌的实验室诊断实验

目的和要求

熟悉布氏杆菌的特点及其实验室诊断方法。用活布氏杆菌进行实验时，应严格遵守个人防护规则。

实验内容和原理

布氏杆菌的形态和染色特性

取新鲜的布氏杆菌病料制成涂片，用鉴别染色法进行着染，如标本中含有布氏杆菌时，菌体可被染成红色，而其他细菌则被染成绿色或蓝色，便于区别。2.2．平板凝集反应和乳汁环状反应

取待检血清与平板凝集抗原以及待检乳汁与乳汁环状反应抗原（蓝色或红色）进行抗原抗体反应，并作对照，观察凝集反应的凝集片大小以及乳汁环状反应颜色的变化来进行诊断。3．需用的仪器和试剂等

显微镜、培养箱、水浴锅、移液枪、载波片、指形管、吸管等

布氏杆菌平板凝集抗原、环状乳汁反应抗原、布氏杆菌血清、布氏杆菌乳汁、改良萋—尼氏法染色液

实验步骤

样品涂片——干燥——固定——改良萋—尼氏法染色——干燥——镜检

待检血清分别置玻片上——加布氏杆菌平板凝集抗原——室温下混合—— 30℃作用3-5min——记录反应结果。另设阳性对照和阴性对照。

待检乳汁1ml分别置反应管中——加环状乳汁反应抗原0.05ml——充分混合——置37℃水浴1h——立即判定结果。另设阳性对照和阴性对照。

教学方式

准备好实验器材，先介绍实验方法并演示，然后每个学生单独操作、观察、记录报告结果。

考核要求

观察实验步骤和方法的掌握程度，评阅实验报告，综合评分。

实验报告要求

实验报告包括题目、目的要求和原理、操作步骤、注意事项、实验结果和讨论。

目的和要求

实验二 炭疽杆菌的检出和鉴定实验

掌握炭疽病组织涂片诊断的要点，学会诊断炭疽病的实验方法。用活炭疽杆菌进行实验时，应严格遵守个人防护规则。

实验内容和原理

炭疽杆菌的涂片标本观察

炭疽杆菌在组织中表现为单个砖头状或2-5个短链的竹节状杆菌，用美蓝染色可以观察。

串珠试验

炭疽杆菌遇有微量青霉素存在时，可生长成L型，菌体成串珠状，而类炭疽杆菌由于对青霉素不敏感，则不具有此特性。因此可鉴定诊断。

Ascoli氏沉淀反应实验

将炭疽杆菌可疑检样制备成抗原，与已知高效价炭疽沉淀血清反应，根据其沉淀环的有无可进行鉴定。

需用的仪器和试剂等

显微镜、培养箱、水浴锅、移液枪、载波片、指形管、吸管等

高效价炭疽沉淀血清、炭疽杆菌病理组织、青霉素、美蓝染色液、革兰氏染色液等

实验步骤

病理组织——涂片——美蓝染色液染色——镜检——绘图

取2ml