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篇一：造就基的制备与灭菌实验陈述

陕西师范大学长途教导学院

生物学实验陈述

陈述标题造就基的制备与灭菌

姓名刘伟

学号

专业生物科学

批次/层次

指点教师

进修中间造就基的制备与灭菌

一.目标请求

1.控制微生物实验室经常运用玻璃器皿的清洗及包扎办法.

2.控制造就基的设置装备摆设原则和办法.

3.控制高压蒸汽灭菌的操纵办法和留意事项.

二.基起源基本理

牛肉膏蛋白胨造就基：

是一种运用最普遍和最通俗的细菌基本造就基,有时又称为通俗造就基.因为这

种造就基中含有一般细胞发展滋生所须要的最根本的养分物资,所以可供细菌

发展滋生之用.

高压蒸汽灭菌：

如果经由过程升温使蛋白质变性从而达到杀逝世微生物的后果.将灭菌的物

品放在一个密闭和加压的灭菌锅内,经由过程加热,使灭菌锅内水沸腾而产生蒸

汽.待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽,封闭排气阀持续加热.此时蒸汽不溢

出,压力增大,沸点升高,获得高于100℃的温度导致菌蛋白凝固变性,而达到

灭菌的目标.

三.实验材料

1.药品：牛肉膏.蛋白胨.nacl.琼脂.1mol/l的naoh和hcl溶液.

2.仪器及玻璃器皿：天平.高压蒸汽灭菌锅.移液管.试管.烧杯.量筒.三

角瓶.造就皿.玻璃漏斗等.

3.其他物品：药匙.称量纸.ph试纸.记号笔.棉花等.

四.操纵步调

（一）玻璃器皿的洗涤和包装

1．玻璃器皿的洗涤

玻璃器皿在运用前必须洗刷清洁.将三角瓶.试管.造就皿.量筒等浸入含有洗涤

剂的水中．用毛刷刷洗,然后用自来水及蒸馏水冲净.移液管先用含有洗涤剂的

水浸泡,再用自来水及蒸馏水冲洗.洗刷清洁的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用.

2．灭菌前玻璃器皿的包装

（1）造就皿的包扎：造就皿由一盖一底构成一套,可用报纸将几套造就皿包

成一包,或者将几套造就皿直接置于特制的铁皮圆筒内,加盖灭菌.包装后的造

就皿须经灭菌之后才干运用.

（2）移液管的包扎：在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉),它的作

用是防止外界及口中杂菌进入管内,并防止菌液等吸进口中.塞入此小段棉花应

距管口约0.5cm阁下,棉花自身长度约1~1.5cm.塞棉花时．可用一外围拉直的

曲别针.将少许棉花塞入管口内.棉花要塞得松紧合适,吹时以能通气而又不使

棉花滑下为准.

先将报纸裁成宽约5cm阁下的长纸条,然后将已塞好棉花的移液管尖端放在长

条报纸的一端,约成45℃角,折叠纸条包住尖端,用左手握住移液管身,有手将

移液管压紧．在桌面上向前搓转,以螺旋式包扎起来.上端残剩纸条,折叠打结,

预备灭菌.

（二）液及固造就基的配制进程

1．液造就基配制

（1）称量（假定配制1000ml造就基）

按造就基配方比例依次精确地称取3.0g牛肉膏.10.0g蛋白胨.5.0gnacl放入

烧杯（或1000ml刻度珐琅杯）中．牛肉膏经常运用玻棒挑取,放在小烧杯或概

况皿中称量,用热水熔解后倒入烧杯.

（2）熔解

在上述烧杯中先参加少于所须要的水量（履约700ml）,用玻棒搅匀,然后,在

石棉网上加热使其消融,将药品完全消融后,填补水到所需的总积（1000ml）;

假如配制固造就基时,将称好的琼脂放人已溶的药品中,再加热熔解,最后补

足所损掉的水分.

（3）调ph

调ph：一般用ph试纸测定造就基的ph.用铰剪剪出一小段ph试纸,然后用镊

子夹取此段ph试纸,在造就基中蘸一下,不雅看其ph规模,如造就基偏酸或偏

碱时,可用1mol/lnaoh或1mol/lhcl溶液进行调节.调节ph时,应逐滴参加

naoh或hci溶液,防止局部过酸或过碱,损坏造就基中成分.边加边搅拌,其实

不时用ph试纸测试,直至ph达7.4-7.6.反之,用1mol／lhcl进行调节.

2．固造就基的配制

配制固造就基时,应将已配好的液造就基加热煮沸,再将称好的琼脂

(1.5~2％)加

入,并用玻棒不竭搅拌,以免糊底烧焦.持续加热至琼脂全熔化,最后补足因蒸

发而掉去水分.

（三）造就基的分装

依据不合须要,可将已配好造就基分装入试管或三角瓶内,分装时留意不要使造

就基沾污管口或瓶口,造成污染.如操纵不当心,造就基沾污管口或瓶口时,可用

镊子夹一小块脱脂棉,擦去管口或瓶口的造就基,并将脱脂棉弃去.

1．试管的分装

取一个玻璃漏斗,装在铁架上,漏斗下连一根橡皮管,橡皮