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抗砷性的人骨髓间充质干细胞永生化及其分化的研究的开题报告

开题报告

论文题目：抗砷性的人骨髓间充质干细胞永生化及其分化的研究

一、研究背景

急性早幼粒细胞白血病（AcutePromyelocyticLeukemia,APL）是一种由PML-RARα基因重排引起的危重疾病，其临床特点为难治性出血、凝血功能障碍、高死亡率等。由于ArsenicTrioxide(As2O3)具有高度的治疗效果，近年来被广泛应用于APL的治疗。然而，长期使用As2O3可能导致骨髓衰竭和肝肾损伤等毒副作用。因此，研究抗砷性干细胞对预防骨髓衰竭具有重要意义。

骨髓干细胞（BMSCs）具有多重分化潜能，能够分化为肌肉、骨质和脂肪等多种细胞类型，同时也是维持骨髓微环境和调节免疫反应的重要细胞类型。因此，研究抗砷性干细胞的分化特性，有助于深入理解干细胞的生物学特性和为临床治疗提供新思路。

二、研究目的

本研究旨在将抗砷性的BMSCs进行永生化处理，从而获得足够的细胞数量供对其分化特性的研究。同时，探索抗砷性BMSCs的多向分化特性，为临床治疗提供新的治疗方案。

三、研究方法

1.骨髓间充质干细胞的培养与鉴定

从ATCC中购买人骨髓间充质干细胞（BMSCs），按照ATCC提供的培养条件进行培养。采用流式细胞术检测表面标记物CD105、CD73、CD90、CD45、CD34和CD11b的表达，严格鉴定细胞纯度。

2.永生化处理

利用TERT病毒将BMSCs进行转染，筛选并通过PCR技术鉴定TERT霉素酶基因的表达，确保细胞成功实现永生化转化。

3.抗砷性处理

将永生化BMSCs分为两组：实验组和对照组。实验组在As2O3诱导下进行长期培养，以筛选出抗砷性细胞，对照组不加以干预。

4.多向分化实验

将处理后的BMSCs进行肌肉、骨质和脂肪的诱导分化，通过方法检测特定标记物的表达及细胞形态的变化。

四、研究意义

本研究将从抗砷性BMSCs的永生化和多向分化的两个方面入手，为深入理解干细胞生物学特性和探索临床治疗提供新思路。与此同时，本研究对于制定以人体干细胞为基础的干细胞治疗策略和产生新的干细胞线提供重要理论和实验依据，具有极其广阔的应用前景。