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抗生素体外及体内抑菌效应检测的实验

综述报告

1实验意义

本综合实验项目作为微生物学实验的补充和深入，选择抗生素

为实验材料，主要内容包括抗生素的体外抑菌实验、抗生素的体内

抗菌实验，形成一个整体的综合性实验。在实验内容上强调系统性、

专业性、实用性和趣味性；涉及微生物学专业多项技术原理、复杂

流程，将整体实验课程的水平从分散的基础实验提升到综合性、系

统性更高的层次，对学生的动手能力、专业水平、科研素质等进行

全面的培养和提高，此即本项目设计的意义所在。

2实验目的

1

（）了解常用抗菌药物的抗菌作用及抗菌范围，并掌握抗菌

药物的某些体外抗菌实验；

2

（）观察血液、细菌、药物三者相互作用，以加深学生对抗菌

药物药理作用的认识；

3

（）通过理论联系实际的学习和操作训练，训练学生掌握医

学微生物学综合实验技能和实验技巧，提高动手能力，有助于学生

科学世界观的形成；

4

（）培养学生独立操作、分析解决问题的能力，提高对微

生物学的兴趣，为学生独立创业提供一些创业技能思路。

3实验原理

金黄色葡萄球菌是机会致病菌，而抗菌药物在一定浓度下对其

有抑制和杀灭作用。抗菌药物一般是指具有抑菌或杀菌活性的药物，

包括各种抗生素、磺胺类、咪唑类、硝基咪唑类、喹诺酮类等化学

合成药物。由细菌、放线菌、真菌等微生物经培养而得到的某些产

物，或用化学半合成法制造的相同或类似的物质，也可化学全合成。

药物的体外抑菌实验，是指在体外测定药物抑制或杀灭细菌能

力的实验。它是常用抗菌实验的方法，其中最常用的方法有系列稀

释法和琼脂扩散法。

稀释法有液体培养基连续稀释法和固体稀释法（斜面法）两种，

这两种方法都可以用来测定药物的最小抑菌浓度（MIC）：是指该

药物能抑制细菌生长的最低浓度，通常用？滋g/mL或U/mL表示。

其结果判断方法为凡无肉眼可见细菌生长的药物最低浓度即为该菌

的最小抑菌浓度（MIC）。

琼脂扩散法是将抗菌药物加至接种试验菌的平板表面，抗菌药

物在琼脂胶内向四周自由扩散，其浓度随扩散距离增大而降低。在

药物一定的扩散距离内，由于药物的抗菌效应，试验菌不能生长，

此无菌生长的范围称为抑菌圈。抑菌圈的大小与药物的抑菌效应成

正比。琼脂扩散法常有纸片法、管碟法、打洞法和挖沟法。

一般药敏实验常采用纸片法，我们可以根据抑菌圈的大小，来判断

菌种对药物的敏感性，是敏感，中度敏感还是耐药。

药物的体内抗菌实验又称为动物实验治疗试验或保护力试验。

当抗菌药物进入机体后，其效力的发挥要受体内各种因素的影响。

如血液及组织内的蛋白质或磷脂、浓汁内的核酸均与药物结合，降

低药物的活性；坏死组织内的酸性环境也能影响药物的活性。机体

内的微生物代谢活动较低，对药物的敏感性降低，有时还可以形成

细胞壁缺陷型细菌，对某些药物不敏感。机体内各组织中药物的吸

收、分布不同，使药物的浓度难以恒定。因此在评定新药的药效时

除做体外抑菌实验外还需要做体内的抗菌实验。

4实验操作

4.1实验材料与用品

材料：宿主（兔、鸡等）经抗凝处理后血液全血组分，人工培

U937209-P*****5

养的人单核巨噬细胞,金黄色葡萄球菌（或）标

准株。

EPEPEP

器材：灭菌管（管），管架，新鲜全血，枪头（黄、

10L100L1mL

白、蓝），微量移液器（？滋，？滋，），灭菌小棉

签，小镊子，圆形滤纸（直径为6mm），培养皿，紫外分光光度计，

电热恒温培养箱，恒温振荡培养，细胞培养板。

药品与试剂：青霉素，链霉素，四环素