谷氨酸生产菌的特征育种及扩大培养.ppt

第五节利用生物工程新技术选育谷氨酸生产菌一、应用原生质体融合技术第32页,共48页，星期六，2024年，5月钝齿棒杆菌B9(细胞个体大、易于提取；产酸率低)天津短杆菌TG-866(产酸率高)融合子F263(细胞个体大、产酸率高)第33页,共48页，星期六，2024年，5月二、应用转化法第34页,共48页，星期六，2024年，5月三、应用转导法第35页,共48页，星期六，2024年，5月四、应用重组DNA技术第36页,共48页，星期六，2024年，5月第六节菌种的扩大培养和种子的质量要求一、菌种扩大培养的目的接种量的需要菌种的驯化缩短发酵时间、保证生产水平第37页,共48页，星期六，2024年，5月二、菌种扩大培养的过程第38页,共48页，星期六，2024年，5月1、斜面菌种的培养培养基：葡萄糖0.1%，蛋白胨1%，牛肉膏1%，氯化钠0.25%，酵母膏0.5%，琼脂2%，pH7.0-7.2培养基特点：有利于菌体的生长，原料比较精细。生长斜面要求：32℃，生长18-24小时，生长良好，所使用斜面连续传代不超过3次第39页,共48页，星期六，2024年，5月2.一级种子培养（摇瓶）培养条件：于1000ml三角瓶中，装液200-250ml,32℃培养12小时。培养基：葡萄糖2%，尿素0.5%，玉米浆2.5%，K2HPO40.1%，FeSO42mg/k,MnSO42mg/kgPH7.0培养基特点：有利于菌体的生长，所使用的原料已经基本接近于发酵培养基.第40页,共48页，星期六，2024年，5月一级种子培养的质量要求：种龄：12hPH：6.4光密度：OD值净增0.5以上残糖：0.5%以下噬菌体检查：无镜检：菌体生长均匀、粗壮，排列整齐革兰氏染色：阳性反应。第41页,共48页，星期六，2024年，5月3.二级种子培养(种子罐)培养基：水解糖液3%，尿素0.4%，Na2HPO40.3%，玉米浆2.5%，KCl0.14%，消泡剂0.5-1kg，PH7.0培养条件：在种子罐中培养（容积为发酵罐的1%），32℃培养7-10个小时第42页,共48页，星期六，2024年，5月二级种子培养操作流程种子罐配料培养基加至罐体积60-75%空消0.2MPa，130℃,50min打料实消接种0.1MPa，118℃,5min第43页,共48页，星期六，2024年，5月二级种子培养的质量要求：种龄：7-8hPH：7.2光密度：OD值净增0.5以上残糖：消耗1%左右噬菌体检查：无镜检：菌体生长旺盛，排列整齐革兰氏染色：阳性反应。第44页,共48页，星期六，2024年，5月三、影响种子质量的主要因素培养基温度pH值溶解氧接种量种龄第45页,共48页，星期六，2024年，5月本章作业：一、简述现有谷氨酸生成菌的主要特征。二、简述谷氨酸发酵不同阶段的菌体形态。三、谷氨酸发酵日常菌种工作有哪些？四、简述菌种扩大培养的一般过程。五、简述二级种子培养操作流程。第46页,共48页，星期六，2024年，5月第47页,共48页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第48页,共48页，星期六，2024年，5月关于谷氨酸生产菌的特征育种及扩大培养第一节.谷氨酸生产菌的主要特征一、现有谷氨酸生产菌的分类现有谷氨酸生产菌主要是棒状杆菌属、短杆菌属、小杆菌属及节杆菌属中的细菌。1.棒状杆菌属(Corynebacterium)直到微弯的杆菌，一端膨大呈棒状，折断分裂形成“八”字形或栅状排列。葡萄糖发酵产酸，G+第2页,共48页，星期六，2024年，5月2短杆菌属(Brevibacterium)短的不分枝直杆菌。多数从葡萄糖发酵产酸，不发酵乳糖。G+3小杆菌属(Microbacterium)形态与棒状杆菌相似。发酵葡萄糖产酸弱，主要产乳酸。G+第3页,共48页，星期六，2024年，5月4节杆菌属(Arthrobacterium)培养过程中，细胞形态变化较大球菌杆菌，杆菌球菌。G+G-,G-G+能液化明胶，从碳水化合物产酸极少或不产酸。第4页,共48页，星期六，2024年，5月二、