新教材适用2025版高考生物二轮总复习第1部分核心考点突破专题9生物技术与工程第1讲发酵工程核心考点.docVIP

核心考点二微生物的培育技术及应用

1.消毒和灭菌的辨析

项目

条件

结果

常用方法

应用范围

消毒

较为温柔的物理、化学或生物等方法

仅杀死物体表面或内部一部分微生物(不包括芽孢和孢子)

煮沸消

毒法

日常用品

巴氏消

毒法

不耐高温的液体(如牛奶)

化学药品

消毒法

操作者双手、水源

紫外线

消毒法

接种室、接种箱或超净工作台等

灭菌

剧烈的理化方法

杀死物体内外全部的微生物，包括芽孢和孢子

湿热灭菌(其中高压蒸汽灭菌法效果最好)

培育基及容器的灭菌

干热灭

菌法

耐高温的和须要保持干燥的物品(如玻璃器皿、金属用具等)

灼烧灭

菌法

接种工具(如涂布器、接种环、接种针或其他金属用具)

2.两种纯化方法的比较

项目

平板划线法

稀释涂布平板法

分别结果

关键操作

接种环在固体培育基表面连续划线

①一系列的梯度稀释；②涂布平板操作

接种用具

接种环

涂布器

优点

可以视察菌落特征，对混合菌进行分别

可以计数，可以视察菌落特征

缺点

不能计数

操作较麻烦，平板不干燥效果不好，简单扩散

共同点

都要用到固体培育基；都需进行无菌操作；都能在培育基表面形成单个的菌落；都可用于视察菌落特征

3.选择培育基与鉴别培育基的比较

项目

选择培育基

鉴别培育基

制备方法

培育基中加入或缺少某些化学物质

培育基中加入某种指示剂或化学药品

原理

依据某些微生物对某些物质或环境条件的嗜好或抗性而设计

产生特定的颜色或其他改变

用途

从众多微生物中分别出所需的微生物

鉴别不同种类的微生物

真题感悟

常考题型一微生物培育的基本操作

典例1(2024·山东卷)平板接种常用在微生物培育中。下列说法正确的是(D)

A．不含氮源的平板不能用于微生物培育

B．平板涂布时涂布器运用前必需进行消毒

C．接种后未长出菌落的培育基可以干脆丢弃

D．利用以尿素为唯一氮源的平板能分别出合成脲酶的微生物

【解析】不含氮源的平板可用于固氮菌的培育，A错误；平板涂布时涂布器运用前必需浸在酒精中，然后在火焰上灼烧灭菌，这种操作属于灭菌，不属于消毒，B错误；运用后的培育基即使未长出菌落也要在丢弃前进行灭菌处理，不能干脆丢弃，以免污染环境，C错误；脲酶可以催化尿素分解，在以尿素为唯一氮源的平板上，能合成脲酶的微生物可以分解尿素获得氮源而进行生长繁殖，但是不能合成脲酶的微生物因缺乏氮源而无法生长，因此以尿素为唯一氮源的平板能分别出合成脲酶的微生物，D正确。故选D。

典例2(2024·湖北卷)灭菌、消毒、无菌操作是生物学试验中常见的操作。下列叙述正确的是(D)

A．动、植物细胞DNA的提取必需在无菌条件下进行

B．微生物、动物细胞培育基中需添加肯定量的抗生素以防止污染

C．为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培育基进行灭菌

D．可用湿热灭菌法对试验中所运用的微量离心管、细胞培育瓶等进行灭菌

【解析】动、植物细胞DNA的提取不须要在无菌条件下进行，A错误；动物细胞培育基中需添加肯定量的抗生素以防止污染，保证无菌环境，而微生物的培育不能加入抗生素，B错误；一般用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培育基进行灭菌，以防止杂菌污染，C错误；可用湿热灭菌法对试验中所运用的微量离心管、细胞培育瓶等进行灭菌，以防止杂菌污染，D正确。故选D。

典例3(2024·天津卷)下列操作能达到灭菌目的的是(C)

A．用免洗酒精凝胶擦手

B．制作泡菜前用开水烫洗容器

C．在火焰上灼烧接种环

D．防疫期间用石炭酸喷洒教室

【解析】用免洗酒精凝胶擦手属于消毒，A错误；制作泡菜前用开水烫洗容器属于消毒过程，B错误；在火焰上灼烧接种环能达到灭菌目的，C正确；防疫期间用石炭酸喷洒教室，属于消毒，D错误。故选C。

典例4(2024·全国乙卷)化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业、用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培育所利用的碳源关系亲密。为此，某小组通过试验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响，结果见表。

碳源

细胞干重(g/L)

S产量(g/L)

葡萄糖

3.12

0.15

淀粉

0.01

0.00

制糖废液

2.30

0.18

回答下列问题。

(1)通常在试验室培育微生物时，须要对所需的玻璃器皿进行灭菌，灭菌的方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌(答出2点即可)。

(2)由试验结果可知，菌株C生长的最适碳源是葡萄糖；用菌株C生产S的最适碳源是制糖废液。菌株C的生长除须要碳源外，还须要氮源、无机盐、水(答出2点即可)等养分物质。

(3)由试验结果可知，碳源为淀粉时菌株C不能生长，其缘由是缺少淀粉酶。

(4)若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产S的最适碳源浓度，某同学进行了相关试验。请简要写出试验思路：分别配制一系列不同浓度梯度的以制糖废液为唯一碳源