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海藻中岩藻黄质的测定方法高效液相色谱法
1范围
本文件规定了海藻中岩藻黄质测定方法。
本文件适用于海带、裙带菜、羊栖菜、铜藻中岩藻黄质的测定。
2规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件。
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4方法原理
采用80%甲醇或60%乙醇水溶液提取试样中岩藻黄质，提取液经反相C18色谱柱分离后，用配有紫
外检测器的液相色谱仪测定，根据谱图中岩藻黄质的保留时间和峰面积，进行样品中岩藻黄质的定量分
析。
5试剂与材料
甲醇：分析纯。
乙醇：分析纯。
80%甲醇水溶液：量取800mL甲醇（5.2），溶于水并稀释至1000mL。
60%乙醇水溶液：量取600mL乙醇（5.3），溶于水并稀释至1000mL。
甲醇：色谱纯。
岩藻黄质标准样品：纯度大于98%。
岩藻黄质标准储备液：精密称取10.0mg的岩藻黄质（5.6）标准样品，用甲醇（5.5）溶解，定
容至50.00mL，置于-20℃保存。
岩藻黄质标准工作液：准确移取适量的岩藻黄质标准储备液（5.7），用甲醇（5.6）定容稀释成
浓度分别为0.40µg/mL、0.80µg/mL、1.60µg/mL、3.20µg/mL、6.41µg/mL、12.81µg/mL、25.63
µg/mL标准工作液，现配现用。
除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T6682规定的一级水。
6仪器与设备
超声波清洗机。
高效液相色谱仪，配紫外检测器，波长范围190nm~800nm。
分析天平，感量0.01g和0.0001g。
容量瓶：100mL。
万能粉碎机：200mL。
超声波提取机：500W。
1
恒温水浴锅。
三角烧瓶：125mL。
针式滤头：尼龙66，直径13mm，孔径0.45μm。
7分析步骤
样品前处理
新鲜样品或干燥样品经万能粉碎机（6.5）粉碎，避光低温保存。
提取
7.2.1海带
准确称取经7.1处理后的干海带粉2.00g或新鲜海带粉5.00g（精确到0.01g）置于125mL三角烧瓶
（6.8），加50mL80%甲醇水溶液（5.3），超声提取30min，滤纸过滤，滤液转移至100mL容量瓶（6.4），
滤渣按照上述步骤重复提取1次，合并滤液，转移至100mL容量瓶（6.4）,用甲醇（5.1）定容至100mL，
取1mL样品溶液，采用0.45µm针式滤头（6.9）过滤，滤液作为试样溶液。
7.2.2裙带菜
准确称取经7.1处理后的干裙带菜粉2.00g或新鲜裙带菜粉5.00g（精确到0.01g）置于125mL三角
烧瓶（6.8），加50mL80%甲醇水溶液（5.3），超声提取40min，滤纸过滤，，滤渣按照上述步骤重
复提取1次，合并滤液，转移至100mL容量瓶（6.4）,用甲醇（5.1）定容至100mL，取1mL样品溶液，
采用0.45µm针式滤头（6.9）过滤，滤液作为试样溶液。
7.2.3羊栖菜
准确称取经7.1处理后的羊栖菜粉2.00g或新鲜羊栖菜粉5.00g（精确到0.01g）置于125mL三角烧
瓶（6.8），加50mL80%甲醇水溶液（5.3），超声提取40min，滤纸过滤，滤渣按照上述步骤重复提取
1次，合并滤液，转移至100mL容量瓶（6.4）,用甲醇（5.1）定容至100mL，取1mL样品溶液，采用0.45
µm针式滤头（6.9）过滤，滤液作为试样溶液。
7.2.4铜藻
准确称取经7.1处理后的干铜藻粉2.00g或新鲜铜藻粉5.00g（精确到0.01g）置于125mL三角烧瓶
（6.8），加80mL60%乙醇水溶液（5.4），在恒温水浴锅（6.7）中90℃加热回流30min，滤纸过滤，
滤液转移至100mL容量瓶（6.4），用乙醇（5.2）定容至100mL，取1mL样品溶液，采用0.45µm针式滤
头（6.8）过滤，滤液作为试样溶液。
测定
7.3.1色谱条件
色谱参考条件如
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